观察白藜芦醇联合经猪副半奇静脉逆行灌注低温保护液对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及对脊髓组织中微管相关蛋白-2表达的影响。
方法将18只西藏小型猪随机分为3组:手术对照组(I/R组,n=6),冷液逆灌组 (CL组,n=6),白藜芦醇联合冷液逆灌组 (CL+Res组,n=6)。I/R组:常温阻断降主动脉60 min;CL组:阻断前游离出副半奇静脉,阻断降主动脉60 min,同时经副半奇静脉逆行灌注低温(4 ℃)生理盐水,灌注流速为16.65 ml/min| CL+Res组:手术过程同CL组,术后立即管饲白藜芦醇10 mg/kg。各组术中监测动脉压、血气分析、椎管温及鼻咽温的变化。于术后6 h、1、2 d、1、2、4周进行神经功能评分,术后4周取L2~L4段脊髓,采用Western blot法检测脊髓组织中微管相关蛋白-2的表达变化。多组均数比较采用单因素方差分析,两两组间比较用LSD法检验。
结果18只西藏小型猪全部存活。I/R组行为学评分显著降低,6 h、1、2 d CL组和CL+Res组评分均高于I/R组(F=8.612、17.276和11.985,P=0.035,0.011和0.023),术后6 h、2 d CL组和CL+Res组评分差异无统计学意义(P=0.526和0.114),术后1 d CL组和CL+Res组评分差异有统计学意义(P=0.021),随着再灌注时间的延长行为学评分逐渐增加。降主动脉阻断后各组实验动物的鼻咽温及椎管温均有下降,I/R组和两实验处理组分别在阻断60 min和再灌注20 min时,鼻咽温及椎管温降至最低,明显低于阻断前(F=23.187~55.029,P<0.01);再灌注后,I/R组动物的鼻咽温及椎管温均逐渐回升,至再灌注60 min时,鼻咽温及椎管温与阻断前相近(P=0.115和0.302);而CL+Res组与CL组鼻咽温及椎管温回升不明显,在再灌注60min时,鼻咽温及椎管温明显低于阻断前(CL组:P=0.005和0.001; CL+Res组:P=0.002和0.001)。Western blot检测微管相关蛋白-2的表达分别为I/R组0.37±0.18,CL组0.54±0.26,CL+Res组0.66±0.31,在CL+Res组表达水平高于CL组(P=0.021),且CL+Res组与CL组均高于I/R组(F=9.381,P=0.037)。
结论白藜芦醇联合经猪副半奇静脉逆行灌注低温保护液对猪脊髓缺血再灌注损伤有保护作用,并且白藜芦醇可能加强了逆行灌注低温保护液的保护效果。