转化生长因子β1对人脐静脉血管内皮细胞活性的影响

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目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)刺激增生性瘢痕成纤维细胞上清液对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖和趋化能力的影响.方法 以增生性瘢痕成纤维细胞为实验组,正常皮肤为对照组,添加TGF-β1(10 μg/L)为TGF-β1组,向TGF-β1组内添加丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)阻断剂Tricirlbine(5 μmol/L)为Akt阻断剂组,二者皆未添加的瘢痕成纤维细胞为非干扰组,利用各组细胞上清液(条件培养基)培养HUVEC,使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察各条件培养基对HUVEC增殖的影响,并利用细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验对HUVEC的趋化情况进行评估.结果 对照组吸光度值为0.91 ±0.34,非干扰组1.75±0.15,TGF-β1组3.26 ±0.58,Akt阻断剂组1.14 ±0.81.非干扰组吸光度值与对照组和TGF-β1组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);而Akt阻断剂组成纤维细胞增殖吸光度值明显低于TGF-β1组(P<0.01).细胞划痕24 h后,TGF-β1组促使HUVEC划痕的闭合率较非干扰组高(P<0.01);而Akt阻断剂组则明显减弱HUVEC划痕闭合的速度(P<0.01).Transwell细胞迁移实验中,TGF-β1组迁移的细胞较非干扰组多[TGF-β1组细胞迁移数目:(1718±15)个,非干扰组:(829±2)个,P<0.01];而Akt阻断剂组阳性细胞迁移率又明显降低[Akt阻断剂组:(935±11)个,P<0.01].对照组血管内皮生长因子(VEGF) (65.2 ±0.3)ng/L,非干扰组(87.0 ±±0.5)ng/L,TGF-β1组(132.7 ±0.4) ng/L,Akt阻断剂组(70.5±0.6) ng/L.非干扰组与对照组、TGF-β1组与非干扰组、Akt阻断剂组与TGF-β1组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 TGF-β1可以通过刺激增生性瘢痕成纤维细胞旁分泌VEGF等细胞因子对血管内皮细胞增殖、趋化等能力产生影响.
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