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摘要：通过对鲜蜂王浆常见功能成分稳定性的测定，分析了不同贮藏温度、时间对蜂王浆中总糖、水溶性蛋白质、王浆酸和维生素C含量的影响。在35 d贮藏期内，三个不同贮藏温度下测得的数据表明，随着温度升高和贮藏时间的延长，蜂王浆稳定性逐渐变差，其总糖、水溶性蛋白质和维生素C含量受温度影响变化明显；王浆酸含量则基本保持不变，可以作为指标性成分判断王浆质量的好坏。
关键词：蜂王浆；贮藏温度；贮藏时间；王浆酸
中图分类号：S896.3文献标识号：A文章编号：1001-4942（2015）05-0102-03
Study on Quality Change of Royal Jelly during Storage
Sun Xiaojun1，2， Yang Xiaohui2， Li Guiming1，Zheng Shimao2， Dong Yilei1*
（1.Poultry Research Institute， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250023，China；
2.Faculty of Light Industry， Qilu University of Technology，Jinan 250353，China）
AbstractThrough determining the stability of common functional components of fresh royal jelly， the effects of different storage temperatures and time on the content of total sugar， soluble protein， 10-HDA， and vitamin C were analyzed. The results showed that during the storage period of 35 days， the stability of royal jelly became worse gradually with temperature increasing and storage time extending. The content of total sugar， soluble protein and vitamin C were affected by temperature significantly. The content of 10-HDA basically remained unchanged， so it could be used as an index to judge the quality of royal jelly.
Key wordsRoyal jelly； Storage temperature； Storage time； 10-HAD
蜂王浆是由工蜂上颚腺分泌的天然功能产品，可延缓衰老、增强体质、提高机体免疫力，不仅对常见细菌具有较强的抑制作用，而且能够增强巨噬细胞的吞噬活性并可强烈抑制乳腺癌等癌细胞的生长。但由于蜂王浆所含生物活性物质成分复杂，随不同条件组分有所变化，所以需要严格的保存条件。目前关于蜂王浆的贮藏研究主要集中在贮藏温度和保存时间，但是由于评价指标众说纷纭，没有系统衡量不同贮藏条件的方法。本研究采用总糖、王浆酸、水溶性蛋白、维生素C等指标，系统研究不同温度、不同贮藏时间蜂王浆功效成分的稳定性，以期建立销售、流通、消费各环节的贮藏方法。
1材料与方法
1.1材料
新鲜蜂王浆，购自济南市长清区某峰场。
1.2指标检测
1.2.1总糖的测定参照李凤玉（2005）的方法。
1.2.2王浆酸（10-HDA）的测定采用高效液相色谱法。色谱柱C18（10 μm，250 mm×4.6 mm i.d）；流动相：甲醇-0.01 mol/L盐酸溶液（55+45）；流速：1.0 mL/min；柱温：35℃；进样量：2 μL；检测波长：210 nm。
1.2.3水溶性蛋白的测定用Folin-酚试剂法 测定蜂王浆水溶性蛋白的含量。
1.2.4维生素C的测定参照李合生与韩亚珊的染料标定方法：取 1 mL 标准抗坏血酸溶液至三角瓶中，以 2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至粉红色，以30 s 内不褪色为终点，计算 1 mL 染料相当于抗坏血酸的毫克数，重复 3 次，取平均值。
1.3试验设计
购置的新鲜蜂王浆进行以上指标检测。分别放置在-18、4、25℃温度条件下贮藏，并于贮藏第7、14、21、28、35 d检测以上指标。
2结果与分析
2.1不同贮藏条件下总糖含量的变化
从图1可以看出，在三个贮藏温度条件下，随着时间的延长，蜂王浆的总糖含量均呈下降趋势。温度越高总糖含量下降越快，常温（25℃）贮藏35 d时降低到原含量的28.31%，而冷冻温度条件下（-18℃）可维持在90.38%。
2.2不同贮藏条件10-HDA含量的变化
如图2所示，在三个温度条件下10-HDA含量变化趋势均相同，贮藏0～7 d 10-HDA含量降低较快，8～35 d基本保持稳定。有意义的是，即使在25℃高温条件下10-HDA降低也十分缓慢，35 d后达到1.44%，仍符合国家标准。
2.3不同贮藏条件下水溶性蛋白含量的变化
由图3可以看出，随贮藏时间的延长，不同温度下的蜂王浆水溶性蛋白含量呈逐渐下降趋势。-18℃与4℃时，水溶性蛋白含量前两周维持平稳，第三周开始下降。在试验期内，-18℃水溶性蛋白含量变化最小；当温度上升到25℃时，水溶性蛋白含量降低明显，仅为起始含量的41.96%。 2.4不同贮藏条件下维生素C含量的变化
维生素C易被氧化，所以本研究以其为评价指标之一。由图4明显看出，不同温度条件下，维生素C均呈下降趋势，这与其不稳定的理化性质相吻合。相对而言，在-18℃冷冻条件下时，其含量变化很小，35 d试验期内仅降为原来的81.6%；而在4℃时，维生素C氧化降解速度加快，35 d后损失了90%；尤其在常温25℃条件时降解更快，28 d时已经检测不到维生素C的含量。
3结论与讨论
本试验选择了-18℃（冰箱冷冻）、4℃（冰箱冷藏）、 25℃（常温）三个有代表性的温度条件，对蜂王浆中主要有效成分总糖、王浆酸、水溶性蛋白、维生素C含量变化进行了分析。结果表明，在35 d贮藏期内，4种有效成分均随处理温度升高和处理时间的延长不断下降，其中总糖和维生素C含量显著下降，王浆酸基本不变；维生素C含量在4℃贮藏35 d仍未完全损失可能是蜂王浆在贮藏过程中酸度有了明显的提高，酸性环境对维生素C有一定的保护作用，而正是因为低温和王浆本身的酸性，-18℃贮藏蜂王浆的维生素C含量变化最小。
本研究表明在-18℃条件下贮藏，蜂王浆营养成分稳定性最好；王浆酸含量十分稳定，同时由于其具有多种抗菌、抗肿瘤等活性，可作为判断蜂王浆质量的重要标志成分。
参考文献：
[1]许宝华， 刘志勇， 曾志将.蜂王浆对雄兔生长及繁殖性能的影响[J].中国农业科学，2011，44（10）：2154-2160.
[2]陆莉， 林志彬. 蜂王浆的药理作用及相关活性成分的研究进展[J]. 医药导报， 2004（12）： 887-890.
[3]Fujiwara S， Imai J， Fujivara M， et al. A potent antibacterial protein in royal jelly purification and determination of the primary structure of royalisin[J]. The Journal of Biological Chemistry， 1990， 265： 11333-11337.
[4]Eshraghi S， Seifollahi F. Antibacterial effects of royal jelly on different strains of bacteria[J]. Iranian J. Pub.l Health， 2003，32：25-30.
[5]王腾飞， 王瑞明. 10-HDA抗菌实验的初步研究[J]. 齐鲁工业大学学报：自然科学版，2009，23（3）：17-18，24.
[6]Wang G Y， Lin Z B. Effects of 10-hydroxy-2-decenoic acid on phagocytosis and cytokines production of peritoneal in vitro[J]. Acta Pharmacologica Sinica，1997，2：110-113.
[7]Nakaya M， Onda H， Sasaki K，et al. Effect of royal jelly on bisphenol A-induced proliferation of human breast cancer cells[J]. Biosciences， Biotechnology and Biochemistry，2007，71：253-255.
[8]李凤玉. 用铁氰化钾法测定王浆中总糖的含量[J]. 养蜂科技，2005（3）：5-6.
[9]李建武. 生物化学实验原理和方法[M]. 北京：北京大学出版社， 1994.
[10]李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京：高等教育出版社，1999：246-248.
[11]韩亚珊.食品化学[M].北京：中国农业大学出版社，1998.
关键词：蜂王浆；贮藏温度；贮藏时间；王浆酸
中图分类号：S896.3文献标识号：A文章编号：1001-4942（2015）05-0102-03
Study on Quality Change of Royal Jelly during Storage
Sun Xiaojun1，2， Yang Xiaohui2， Li Guiming1，Zheng Shimao2， Dong Yilei1*
（1.Poultry Research Institute， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250023，China；
2.Faculty of Light Industry， Qilu University of Technology，Jinan 250353，China）
AbstractThrough determining the stability of common functional components of fresh royal jelly， the effects of different storage temperatures and time on the content of total sugar， soluble protein， 10-HDA， and vitamin C were analyzed. The results showed that during the storage period of 35 days， the stability of royal jelly became worse gradually with temperature increasing and storage time extending. The content of total sugar， soluble protein and vitamin C were affected by temperature significantly. The content of 10-HDA basically remained unchanged， so it could be used as an index to judge the quality of royal jelly.
Key wordsRoyal jelly； Storage temperature； Storage time； 10-HAD
蜂王浆是由工蜂上颚腺分泌的天然功能产品，可延缓衰老、增强体质、提高机体免疫力，不仅对常见细菌具有较强的抑制作用，而且能够增强巨噬细胞的吞噬活性并可强烈抑制乳腺癌等癌细胞的生长。但由于蜂王浆所含生物活性物质成分复杂，随不同条件组分有所变化，所以需要严格的保存条件。目前关于蜂王浆的贮藏研究主要集中在贮藏温度和保存时间，但是由于评价指标众说纷纭，没有系统衡量不同贮藏条件的方法。本研究采用总糖、王浆酸、水溶性蛋白、维生素C等指标，系统研究不同温度、不同贮藏时间蜂王浆功效成分的稳定性，以期建立销售、流通、消费各环节的贮藏方法。
1材料与方法
1.1材料
新鲜蜂王浆，购自济南市长清区某峰场。
1.2指标检测
1.2.1总糖的测定参照李凤玉（2005）的方法。
1.2.2王浆酸（10-HDA）的测定采用高效液相色谱法。色谱柱C18（10 μm，250 mm×4.6 mm i.d）；流动相：甲醇-0.01 mol/L盐酸溶液（55+45）；流速：1.0 mL/min；柱温：35℃；进样量：2 μL；检测波长：210 nm。
1.2.3水溶性蛋白的测定用Folin-酚试剂法 测定蜂王浆水溶性蛋白的含量。
1.2.4维生素C的测定参照李合生与韩亚珊的染料标定方法：取 1 mL 标准抗坏血酸溶液至三角瓶中，以 2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至粉红色，以30 s 内不褪色为终点，计算 1 mL 染料相当于抗坏血酸的毫克数，重复 3 次，取平均值。
1.3试验设计
购置的新鲜蜂王浆进行以上指标检测。分别放置在-18、4、25℃温度条件下贮藏，并于贮藏第7、14、21、28、35 d检测以上指标。
2结果与分析
2.1不同贮藏条件下总糖含量的变化
从图1可以看出，在三个贮藏温度条件下，随着时间的延长，蜂王浆的总糖含量均呈下降趋势。温度越高总糖含量下降越快，常温（25℃）贮藏35 d时降低到原含量的28.31%，而冷冻温度条件下（-18℃）可维持在90.38%。
2.2不同贮藏条件10-HDA含量的变化
如图2所示，在三个温度条件下10-HDA含量变化趋势均相同，贮藏0～7 d 10-HDA含量降低较快，8～35 d基本保持稳定。有意义的是，即使在25℃高温条件下10-HDA降低也十分缓慢，35 d后达到1.44%，仍符合国家标准。
2.3不同贮藏条件下水溶性蛋白含量的变化
由图3可以看出，随贮藏时间的延长，不同温度下的蜂王浆水溶性蛋白含量呈逐渐下降趋势。-18℃与4℃时，水溶性蛋白含量前两周维持平稳，第三周开始下降。在试验期内，-18℃水溶性蛋白含量变化最小；当温度上升到25℃时，水溶性蛋白含量降低明显，仅为起始含量的41.96%。 2.4不同贮藏条件下维生素C含量的变化
维生素C易被氧化，所以本研究以其为评价指标之一。由图4明显看出，不同温度条件下，维生素C均呈下降趋势，这与其不稳定的理化性质相吻合。相对而言，在-18℃冷冻条件下时，其含量变化很小，35 d试验期内仅降为原来的81.6%；而在4℃时，维生素C氧化降解速度加快，35 d后损失了90%；尤其在常温25℃条件时降解更快，28 d时已经检测不到维生素C的含量。
3结论与讨论
本试验选择了-18℃（冰箱冷冻）、4℃（冰箱冷藏）、 25℃（常温）三个有代表性的温度条件，对蜂王浆中主要有效成分总糖、王浆酸、水溶性蛋白、维生素C含量变化进行了分析。结果表明，在35 d贮藏期内，4种有效成分均随处理温度升高和处理时间的延长不断下降，其中总糖和维生素C含量显著下降，王浆酸基本不变；维生素C含量在4℃贮藏35 d仍未完全损失可能是蜂王浆在贮藏过程中酸度有了明显的提高，酸性环境对维生素C有一定的保护作用，而正是因为低温和王浆本身的酸性，-18℃贮藏蜂王浆的维生素C含量变化最小。
本研究表明在-18℃条件下贮藏，蜂王浆营养成分稳定性最好；王浆酸含量十分稳定，同时由于其具有多种抗菌、抗肿瘤等活性，可作为判断蜂王浆质量的重要标志成分。
参考文献：
[1]许宝华， 刘志勇， 曾志将.蜂王浆对雄兔生长及繁殖性能的影响[J].中国农业科学，2011，44（10）：2154-2160.
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[4]Eshraghi S， Seifollahi F. Antibacterial effects of royal jelly on different strains of bacteria[J]. Iranian J. Pub.l Health， 2003，32：25-30.
[5]王腾飞， 王瑞明. 10-HDA抗菌实验的初步研究[J]. 齐鲁工业大学学报：自然科学版，2009，23（3）：17-18，24.
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[8]李凤玉. 用铁氰化钾法测定王浆中总糖的含量[J]. 养蜂科技，2005（3）：5-6.
[9]李建武. 生物化学实验原理和方法[M]. 北京：北京大学出版社， 1994.
[10]李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京：高等教育出版社，1999：246-248.
[11]韩亚珊.食品化学[M].北京：中国农业大学出版社，1998.