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摘要：茅苍术软腐病是一种维管束病害，对菊科中药材茅苍术的产量有严重影响。笔者所在团队在前期试验中筛选出1个生防菌剂组合“宁盾”，能有效防治多种土传病害，并能影响土壤微生物多样性，提高作物产量。故在此试验中以其为试验处理，以清水处理与化学药剂处理为对照，探究4种不同用量（45、75、135、180 L/hm2）的生防菌剂组“宁盾”对茅苍术生长的促进效果和对苍术软腐病的防治效果。结果表明，不同浓度的“宁盾”对茅苍术具有不同程度的促生效果和苍术软腐病防效，其中以75 L/hm2浓度的促生防病效果最好。与清水对照相比，在该浓度“宁盾”处理下，茅苍术的出苗率提高47.43%，成活率提高25.57%，同时能使茎粗和叶片数分别增加22.29%、28.25%，软腐病和叶斑病防效可达到61.52%与38.21%。
关键词：茅苍术;生防菌剂“宁盾”;软腐病;防治效果;出苗率
茅苍术[Atractylodes lancea （Thunb.） DC.]是一种菊科中药材，具有燥湿健脾、祛风散寒、明目的功效。茅苍术主要分布于江苏、湖北和河南等省份，是湖北省地道中药材，在英山县、罗田县、孝昌县等地种植较为广泛。苍术类的药理活性物质主要为萜类、多烯炔类、甾体类、芳香苷类等化学成分[1]。这些物质具有抗糖尿病、抗肿瘤、肝保护、抗菌消炎、保护心脑血管等作用[2]。
苍术软腐病是一种极难防治的维管束病害，由病原细菌胡萝卜软腐欧文氏菌（Erwinia carotovora pv. caratovora）引起。被侵染须根及根茎初期呈褐色水渍状，随后软腐发臭，仅残留纤维组织;受害植株地上部先出现萎蔫症状，后期枯死[3]。中药材茅苍术主要是收获其根茎部，软腐病一旦发生蔓延，将造成严重损失，因此软腐病的预防尤为重要。近年来，茅苍术的规模化种植面积日益扩大，其软腐病害问题也愈受关注。
苍术叶斑病是一种由链格孢属病原引起的叶部病害，少数发生在叶柄和茎部。发病叶片上形成圆形或椭圆形不规则深褐色病斑，并产生轮纹，偶尔产生灰白色霉层，叶片两面散生小黑点。发病严重时叶片干枯，茎部坏死[4]。
生防菌剂“宁盾”是南京农业生物农药及绿色植保实验室经过前期试验筛选出的，其主要成分为芽孢杆菌的三菌合剂。生防菌剂“宁盾”已登记成微生物肥料“宁盾”，于2013年正式取得了微生物肥料登记证[微生物肥（2013）准字（1096）号]，并已通过南京国环有机产品认证中心的评估（证明号 IP-0109-932-1696）。目前，生防菌剂“宁盾”正作为水稻纹枯病和辣椒疫病的生物农药进行登记（农药实验证号为SY201606383）。本试验于2010年3月17日在湖北省孝感市汉川市庙头镇农场华中农大试验田开展，用生防菌合剂“宁盾”和2种化学药剂（甲基硫菌灵、多菌灵）对菊科中药材茅苍术软腐病进行防效试验，从而找出一种可靠安全、环境友好的手段以大幅度降低病害发生率，并提高药材产量。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料：生防菌剂“宁盾”、25%甲基硫菌灵可湿性粉剂、70%多菌灵可湿性粉剂。
菌株培养方法：从超低温冰箱中取出保存的菌蜡质芽胞杆菌（Bacillus cereus）AR156、枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）SM21、沙雷氏菌（Serratia sp.）XY21划线于28 ℃条件下培养;待长出单菌落，挑取其接入盛有配置好100 mL LB培养基的250 mL规格的三角瓶中，置于28 ℃摇床培养18～20 h后作为种子液;以1%的接种量将种子液接种于1 L规格的大三角瓶培养基里继续于28 ℃摇床培养22～24 h。
生防菌剂“宁盾”制作方法：将AR156、SM21、XY21菌液浓度分别调成终浓度1亿CFU/mL、体积比1 ∶ 1 ∶ 1混合。
供试植物材料：菊科中药材茅苍术（原产湖北省黄冈市英山县）
1.2 试验处理
试验设置4个不同处理：化学药剂甲基硫菌灵和多菌灵处理;生防菌剂“宁盾”处理;清水对照。
1.3 试验方法
1.3.1 药剂处理方法 化学药剂：播种前1 d进行土壤处理，将25%多菌灵可湿性粉剂稀释500倍、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂稀释1 000倍后，分别喷施在土壤表面。
生物菌剂“宁盾”：播种当天灌根;设置4种不同施用浓度（45、75、135、180 L/hm2），在植物生长期分别处理3次，即播种当天、播种后15 d、播种后30 d。
以上每个处理均设3个重复，每个重复小区面积为36 m2（长10 m，宽3.6 m）。各试验小区采用完全随机排列的方式。田间试验具体情况见表1。
1.3.2 出芽率统计 资料和经验显示，茅苍术播种后一般12～15 d即可出苗。由于气候和人工栽培深度不一，导致出苗时间不一致，因此在生防菌剂“宁盾”处理后35 d调查出苗率，之后每月调查1次成活率。
出苗率=出苗数/播种时种子数×100%;
成活率=成活的苗数/出苗数×100%。
1.3.3 促生情况调查 在生防菌剂“宁盾”处理 35 d 时调查茅苍术的芽数、叶片数、茎粗、叶面积、株高。收获期统计产量。
1.3.4 防效统计 通常5月雨水充沛，土壤易积水，软腐病在这个时期发病严重。采用5点取样法对茅苍术随机取样，统计软腐病发病情况。根据Luc提出的病级标准记录病级数，计算病害严重度和生防效果[5]。
软腐病分级标准：0级，健株无病;1级，植株发病叶片占1/3及以下;2级，植株发病叶片占1/3以上或枝梗发病;3级，地下茎发病或叶柄发病形成半边风，即植株一边发黄一边腐烂;4级，全株枯死。
叶斑病分级标准：0级，健株无病斑;1级，病斑面积占叶片面積1%～5%;3级，病斑面积占叶片面积6%～15%;5级，病斑面积占叶片面积16%～25%;7级，病斑面积占叶片面积26%～50%;4级，病斑面积占叶片面积51%～100%。 在本次试验的预期结果中，生防菌剂“宁盾”能促进茅苍术的生长，提高其产量，但是由于试验田地地势低洼，加之遇上梅雨季节，土壤排水能力较差，导致部分植株呼吸作用受阻，根系发育不良，整体成活率低，从而导致这一批茅苍术的产量低。本次试验方案是只针对预期中田间自然发生的软腐病设计，未能考虑到实际发生的叶斑病，因此在处理措施上只采用了灌根处理。在后续试验中，将根据多种苍术重要病害的发生规律设计试验方案：采用随机区组设计来划分各小区;将灌根（土壤）处理和叶片喷施处理相结合;合理选择试验地块，修建排水渠，防止积水情况的发生。
参考文献：
[1]邓爱平，李 颖，吴志涛，等. 苍术化学成分和药理的研究进展[J]. 中国中药杂志，2016，41（21）：3904-3013.
[2]绪 扩. 茅苍术化学成分及药理活性研究[D]. 北京：北京协和医学院，2017.
[3]黄俊斌，李建洪，王 沫，等. 茅苍术主要病害的发生特点及其综合防治技术初控[C]// 全国第六届天然药物资源学术研讨会论文集.南京：中国自然资源学会天然药物资源专业委员会，2004.
[4]张莹莹，张 玲，任美伶，等. 苍术叶斑病的为害特点调查及藥剂筛选试验[J]. 农业开发与装备，2018，201（9）：115-116.
[5]方中达. 植病研究方法[M]. 北京：中国农业出版社，1998.
[6]钱士辉，汪六英，段金廒，等. 茅苍术化学成分及其生物活性研究进展[J]. 中国野生植物资源，2006，25（2）：8-11.
[7]黄 驰，徐有贵，王旭敏. 气相色谱-质谱联用法比较野生与栽培茅苍术挥发油成分[J]. 中国药科大学学报，1989，20（5）：289-290.
[8]徐友贵，苏筱娟. 茅苍术病害的防治研究[J]. 中药材，1990（7）：9-11.
[9]王 宁，戴相群，胡 强，等. 微生物肥料“宁盾”对扁豆的促生效果研究[J]. 园艺与种苗，2017，44（2）：195-203.
[10]Niu D D，Liu H X，Jiang C H，et al. The plant growth-promoting rhizobacterium Bacillus cereus AR156 induces systemic resistance in arabidopsis thaliana by simultaneously activating salicylate- and jasmonate/ethylene-dependent signaling pathways[J]. Mol Plant Microbe Interact，2011，24（5）：533-542.
[11]曲 薇，伍 淼，王旭东，等. 哈茨木霉菌株WY-1对番茄的促生防病效果[J]. 江苏农业科学，2018，46（5）：94-96.
[12]杨晓云，陈志谊，蒋盼盼，等. 解淀粉芽孢杆菌B1619对番茄的促生作用[J]. 中国生物防治学报，2016，32（3）：349-356.
[13]江燕霞，杨建平，马 宁，等. 微生物液体肥料SP-100对油菜苗期生长和生理生化指标的影响[J]. 山东农业科学，2009（7）：72-73.陈小均，陈 文，黄 露，等. 贵州剑河钩藤主要病虫害种类及综合防治[J]. 江苏农业科学，2020，48（12）：84-87.
关键词：茅苍术;生防菌剂“宁盾”;软腐病;防治效果;出苗率
茅苍术[Atractylodes lancea （Thunb.） DC.]是一种菊科中药材，具有燥湿健脾、祛风散寒、明目的功效。茅苍术主要分布于江苏、湖北和河南等省份，是湖北省地道中药材，在英山县、罗田县、孝昌县等地种植较为广泛。苍术类的药理活性物质主要为萜类、多烯炔类、甾体类、芳香苷类等化学成分[1]。这些物质具有抗糖尿病、抗肿瘤、肝保护、抗菌消炎、保护心脑血管等作用[2]。
苍术软腐病是一种极难防治的维管束病害，由病原细菌胡萝卜软腐欧文氏菌（Erwinia carotovora pv. caratovora）引起。被侵染须根及根茎初期呈褐色水渍状，随后软腐发臭，仅残留纤维组织;受害植株地上部先出现萎蔫症状，后期枯死[3]。中药材茅苍术主要是收获其根茎部，软腐病一旦发生蔓延，将造成严重损失，因此软腐病的预防尤为重要。近年来，茅苍术的规模化种植面积日益扩大，其软腐病害问题也愈受关注。
苍术叶斑病是一种由链格孢属病原引起的叶部病害，少数发生在叶柄和茎部。发病叶片上形成圆形或椭圆形不规则深褐色病斑，并产生轮纹，偶尔产生灰白色霉层，叶片两面散生小黑点。发病严重时叶片干枯，茎部坏死[4]。
生防菌剂“宁盾”是南京农业生物农药及绿色植保实验室经过前期试验筛选出的，其主要成分为芽孢杆菌的三菌合剂。生防菌剂“宁盾”已登记成微生物肥料“宁盾”，于2013年正式取得了微生物肥料登记证[微生物肥（2013）准字（1096）号]，并已通过南京国环有机产品认证中心的评估（证明号 IP-0109-932-1696）。目前，生防菌剂“宁盾”正作为水稻纹枯病和辣椒疫病的生物农药进行登记（农药实验证号为SY201606383）。本试验于2010年3月17日在湖北省孝感市汉川市庙头镇农场华中农大试验田开展，用生防菌合剂“宁盾”和2种化学药剂（甲基硫菌灵、多菌灵）对菊科中药材茅苍术软腐病进行防效试验，从而找出一种可靠安全、环境友好的手段以大幅度降低病害发生率，并提高药材产量。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料：生防菌剂“宁盾”、25%甲基硫菌灵可湿性粉剂、70%多菌灵可湿性粉剂。
菌株培养方法：从超低温冰箱中取出保存的菌蜡质芽胞杆菌（Bacillus cereus）AR156、枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）SM21、沙雷氏菌（Serratia sp.）XY21划线于28 ℃条件下培养;待长出单菌落，挑取其接入盛有配置好100 mL LB培养基的250 mL规格的三角瓶中，置于28 ℃摇床培养18～20 h后作为种子液;以1%的接种量将种子液接种于1 L规格的大三角瓶培养基里继续于28 ℃摇床培养22～24 h。
生防菌剂“宁盾”制作方法：将AR156、SM21、XY21菌液浓度分别调成终浓度1亿CFU/mL、体积比1 ∶ 1 ∶ 1混合。
供试植物材料：菊科中药材茅苍术（原产湖北省黄冈市英山县）
1.2 试验处理
试验设置4个不同处理：化学药剂甲基硫菌灵和多菌灵处理;生防菌剂“宁盾”处理;清水对照。
1.3 试验方法
1.3.1 药剂处理方法 化学药剂：播种前1 d进行土壤处理，将25%多菌灵可湿性粉剂稀释500倍、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂稀释1 000倍后，分别喷施在土壤表面。
生物菌剂“宁盾”：播种当天灌根;设置4种不同施用浓度（45、75、135、180 L/hm2），在植物生长期分别处理3次，即播种当天、播种后15 d、播种后30 d。
以上每个处理均设3个重复，每个重复小区面积为36 m2（长10 m，宽3.6 m）。各试验小区采用完全随机排列的方式。田间试验具体情况见表1。
1.3.2 出芽率统计 资料和经验显示，茅苍术播种后一般12～15 d即可出苗。由于气候和人工栽培深度不一，导致出苗时间不一致，因此在生防菌剂“宁盾”处理后35 d调查出苗率，之后每月调查1次成活率。
出苗率=出苗数/播种时种子数×100%;
成活率=成活的苗数/出苗数×100%。
1.3.3 促生情况调查 在生防菌剂“宁盾”处理 35 d 时调查茅苍术的芽数、叶片数、茎粗、叶面积、株高。收获期统计产量。
1.3.4 防效统计 通常5月雨水充沛，土壤易积水，软腐病在这个时期发病严重。采用5点取样法对茅苍术随机取样，统计软腐病发病情况。根据Luc提出的病级标准记录病级数，计算病害严重度和生防效果[5]。
软腐病分级标准：0级，健株无病;1级，植株发病叶片占1/3及以下;2级，植株发病叶片占1/3以上或枝梗发病;3级，地下茎发病或叶柄发病形成半边风，即植株一边发黄一边腐烂;4级，全株枯死。
叶斑病分级标准：0级，健株无病斑;1级，病斑面积占叶片面積1%～5%;3级，病斑面积占叶片面积6%～15%;5级，病斑面积占叶片面积16%～25%;7级，病斑面积占叶片面积26%～50%;4级，病斑面积占叶片面积51%～100%。 在本次试验的预期结果中，生防菌剂“宁盾”能促进茅苍术的生长，提高其产量，但是由于试验田地地势低洼，加之遇上梅雨季节，土壤排水能力较差，导致部分植株呼吸作用受阻，根系发育不良，整体成活率低，从而导致这一批茅苍术的产量低。本次试验方案是只针对预期中田间自然发生的软腐病设计，未能考虑到实际发生的叶斑病，因此在处理措施上只采用了灌根处理。在后续试验中，将根据多种苍术重要病害的发生规律设计试验方案：采用随机区组设计来划分各小区;将灌根（土壤）处理和叶片喷施处理相结合;合理选择试验地块，修建排水渠，防止积水情况的发生。
参考文献：
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[11]曲 薇，伍 淼，王旭东，等. 哈茨木霉菌株WY-1对番茄的促生防病效果[J]. 江苏农业科学，2018，46（5）：94-96.
[12]杨晓云，陈志谊，蒋盼盼，等. 解淀粉芽孢杆菌B1619对番茄的促生作用[J]. 中国生物防治学报，2016，32（3）：349-356.
[13]江燕霞，杨建平，马 宁，等. 微生物液体肥料SP-100对油菜苗期生长和生理生化指标的影响[J]. 山东农业科学，2009（7）：72-73.陈小均，陈 文，黄 露，等. 贵州剑河钩藤主要病虫害种类及综合防治[J]. 江苏农业科学，2020，48（12）：84-87.