【摘 要】
：
目的探讨新生鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞体外培养及鉴定方法,为早产儿肺损伤体外研究提供实验手段。方法取出生24 h内新生Wistar大鼠肺组织,用胰酶和胶原酶消化,经离心和免疫吸附法
【机 构】
：
中国医科大学附属盛京医院儿科,哈尔滨医科大学附属第一医院新生儿科,中国医科大学,
论文部分内容阅读
目的探讨新生鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞体外培养及鉴定方法,为早产儿肺损伤体外研究提供实验手段。方法取出生24 h内新生Wistar大鼠肺组织,用胰酶和胶原酶消化,经离心和免疫吸附法纯化后培养。采用透射电镜和免疫荧光技术进行鉴定。结果体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞18～24 h贴壁,呈多角形,岛状生长。培养24～48 h细胞体积增大,胞浆内颗粒明显,72 h后细胞内颗粒减少,6～7 d细胞失去正常形态。透射电镜可见特异性结构板层小体,免疫荧光可见表面活性蛋白C表达。结论该方法是一种有效分离和纯化新生鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的方法,可用于肺泡Ⅱ型上皮细胞功能及早产儿肺损伤的体外研究。
Objective To investigate the method of culture and identification of alveolar type Ⅱ epithelial cells in neonatal rats in vitro and to provide experimental means for the study of lung injury in premature neonates in vitro. Methods The lungs of newborn Wistar rats were taken out within 24 h, digested with trypsin and collagenase, purified by centrifugation and immunoadsorption and then cultured. Transmission electron microscopy and immunofluorescence were used for identification. Results Alveolar type Ⅱ epithelial cells cultured in vitro for 18-24 h adherent, polygonal, island-like growth. After culturing for 24-48 h, the volume of the cells increased and the intracytoplasmic granules became obvious. After 72 h, the intracellular granules decreased, and the cells lost the normal morphology after 6-7 d. Transmission electron microscopy shows the specific structure of lamina propria, immunofluorescence visible surface active protein C expression. Conclusion This method is an effective method for the isolation and purification of neonatal mouse alveolar type Ⅱ epithelial cells. It can be used for the function of alveolar type Ⅱ epithelial cells and lung injury in premature infants in vitro.
其他文献
目的 研究婴儿型左冠状动脉异常起源于肺动脉(anomalous origin of the left cornary artery from the pulmonary artery,ALCAPA)临床特点、诊断及治疗.方法 2010年1月至2012年6月广东省人民医院小儿心外科手术治疗婴儿型ALCAPA18例,对这些患儿的临床表现、检查诊断与治疗进行回顾性分析.结果 婴儿型ALCAPA临床表现无
目的 探讨儿童脑血管病的临床特点.方法 回顾性分析8例平均年龄为6.86岁的脑血管病患儿的年龄和性别分布情况与发病特点、病因、部位、诊断方法、治疗及预后情况.颅内出血诊断主要依赖头颅计算机断层扫描及核磁共振成像和数字减影血管成像.结果 男女比例为6:2,起病以急性或者亚急性为主(7/8,87.5％).主要临床表现依次为:单侧肢体乏力(4/8,50.0％),意识障碍(4/8,50.0％),头痛(4/
目的 探讨手术切除范围对Ⅳ期神经母细胞瘤生存率的影响.方法 回顾性分析天津医科大学附属肿瘤医院2002年12月至2010年12月确诊的Ⅳ期神经母细胞瘤患儿59例,其中未接受手术切除肿瘤原发灶的17例,不完整切除的9例,完整肉眼切除的33例,其中有镜下残留的10例,无镜下残留的23例.结果 59例有随访资料中的Ⅳ期NB患儿中位生存时间23个月(1～96个月),中位就诊年龄为41个月(13～118个月
目的 探讨外科治疗静脉畸形术后残余静脉畸形的介入硬化治疗效果及其安全性.方法 在我科接受介入硬化治疗的18例静脉畸形患儿,均曾行外科切除术,术后复查MRI均证实仍有部分残余病灶,其中病灶位于四肢并累及肌层6例,病灶位于膝关节或肘关节腔周围2例,病灶位于颈部且包绕颈部血管或侵入颈动脉鞘3例,病灶位于足底并侵入跖骨间隙2例,病灶位于眼眶2例,累及腮腺1例,累及直肠、乙状结肠2例,上述残余病灶外科往往难
目的 调查先天性心脏病患儿的营养风险及其临床结局的相关性,为临床营养管理提供科学依据.方法 应用Strongkid营养风险筛查方法对我院460例先天性心脏病患儿进行营养风险评估,分析营养风险评分的影响因素；调查患儿在住院期间营养支持、术后感染、术后住院时间、监护室时间及治疗费用,阐明不同营养风险对临床结局的影响.结果 460例先天性心脏病患儿入院时高度营养风险的发生率为32.2％,中度营养风险发生
目的 探讨儿童肝外胆管炎性肉芽肿的诊断与治疗.方法 本组共6例,其中女4例,男2例,年龄2～6岁(平均4岁).3例反复腹痛,6例皮肤巩膜黄染,3例出现陶土色便.6例TBIL(46.9～172.2 μmol/L),DBIL (29.3～68.5μmol/L),AST (68.2～277.7 U/L),ALT (48.5～133.9U/L).B型超声:胆总管占位4例,左右肝管占位2例.腹部CT:肝门部
目的 探讨单孔腹腔镜监视下经阴囊入路睾丸固定术治疗高位腹股沟型隐睾症的可行性和效果.方法 2010年8月至2011年7月,23例患儿的27侧高位腹股沟型睾丸在单孔腹腔镜辅助下经阴囊入路完成睾丸固定术,用组织钳通过阴囊横切口经外环进入腹股沟管或腹腔抓住睾丸拖出体外,从精索横断未闭鞘突游离睾丸固定在肉膜外；最后在腹腔镜监视下用自制双钩疝针经皮腹膜外关闭开放鞘突.结果 所有27侧睾丸在腹腔镜监视下成功固
目的 腹腔镜对小儿Amyand,s疝的诊断和治疗在临床上报道极少,本文报道腹腔镜治疗小儿Amyand,s疝6例,探讨该方法初步经验和临床应用价值.方法 回顾分析本研究组2010年10月至20
目的 分析DIXDC1和AXIN2基因在先天性巨结肠症(hirschsprung disease,HSCR)中的表达,探讨其在HSCR中的意义.方法 采用蛋白印迹(Western blot)、免疫组化和荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法检测60例HSCR患儿正常段(有神经节段肠管)和狭窄段(无神经节段肠管)中DIXDC1和AXIN2的表达
目的 探讨儿童软组织内微小金属异物的取出方法.方法 回顾性分析41例软组织内金属异物病例.根据取出方式不同分为A、B两组.A组:26例,C形臂下定位,直接切开取异物.B组:15例,采用C形臂下7号注射器针垂直定位,侧位调节针的深度,亚甲蓝标记,手术取出.比较两组取出成功率,手术时间,切口长度,C形臂照射次数.结果 A组:1例由于异物体积太小,未能取出,手术成功率96％.手术时间平均约53 min.