【摘 要】
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目的 制备获得高纯度的重组SSU05_0272蛋白,并研究其对细胞因子的调控.方法 以05ZYH33基因组为模版,PCR扩增SSU05_0272基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导
【机 构】
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沈阳农业大学生物科学技术学院,军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室
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目的 制备获得高纯度的重组SSU05_0272蛋白,并研究其对细胞因子的调控.方法 以05ZYH33基因组为模版,PCR扩增SSU05_0272基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导表达.上清表达蛋白先后经过镍亲和层析和离子交换层析方法 进行纯化.实时定量PCR方法 检测纯化后的SSU05_0272蛋白与人脑微血管内皮细胞作用后其细胞因子的转录水平变化.结果 制备的SSU05_0272蛋白具有较高的纯度,RT-PCR结果 显示,SSU05_0272蛋白与人脑微血管内皮细胞作用后能上调IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β的表达,下调IL-12P40的表达.结论 SSU05_0272蛋白能够调控促炎症细胞因子和趋化因子转录水平变化,提示其在猪链球菌致炎症反应中起重要作用.
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