【摘 要】
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目的:抗HBs G6mAb制备及其对重组野生与免疫逃逸变异HBsAg结合能力与特点的评价。方法:常规制备并纯化抗HBs mAb,以纯化抗HBs mAb IgG包被,采用ELISA对17种野生及"a"决定簇替
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院医学实验中心; 华中科技大学同济医学院附属同济医院医学实验中心 湖北武汉430030; 湖北武汉430030; 湖北武汉430030中国
【基金项目】
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国家“十五”科技攻关资助项目(2001BA705B05)
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目的:抗HBs G6mAb制备及其对重组野生与免疫逃逸变异HBsAg结合能力与特点的评价。方法:常规制备并纯化抗HBs mAb,以纯化抗HBs mAb IgG包被,采用ELISA对17种野生及"a"决定簇替代性变异全基因重组表达HBsAg进行检测,并与几种市售HBsAg检测试剂进行比较。结果:该杂交瘤细胞生长与分泌特性稳定,其培养上清与腹水效价分别为2048及4096×103;对野生HBsAg检测(ELISA)敏感性不低于0.125μg/L。该抗体可与15种变异抗原中12种发生反应(P/N≥2.5),反应信号强度分别为低反应组(2份,与野生株A值比较,下同)平均7.55%;中反应组(1例)为59.40%;高反应组(9种)分别为野生株的92.1%~109.4%,低反应或无反应表达产物的免疫逃逸变异部位集中在HBV"a"决定簇I环的起始部即120~124序列之间。部分表达产物采用市售试剂作同步检测,平均显色强度高于或明显高于几种国内应用最为普遍的HBsAg ELISA(P<0.05)。结论:抗HBs G6mAb对多数免疫逃逸变异HBsAg有很强的结合能力,所针对的变异类型亦表现出某种特殊的规律。
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