【摘 要】
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目的:探讨补体C9基因缺陷对LPS诱导的小鼠早期肝脏炎症反应和损伤的作用及机制.方法:8～10周龄B6.WT和B6.C9-/-小鼠均随机分为LPS组(n=5)和对照组(n=3),实验重复3次.LPS组腹腔注射LPS(0111:B4)5 mg/kg,对照组注射等体积生理盐水,处理12 h.酶法检测血清ALT、AST水平,HE染色观察肝脏病理学和炎症细胞浸润情况.ELISA检测血清和肝脏组织抽提物中IL-1β、IL-8、TNF-α水平以及血清中可溶型MAC(sMAC)水平.IF观察肝脏组织中巨噬细胞、中性粒细
【机 构】
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潍坊医学院基础医学院,山东省高校免疫学重点实验室,潍坊261053
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目的:探讨补体C9基因缺陷对LPS诱导的小鼠早期肝脏炎症反应和损伤的作用及机制.方法:8～10周龄B6.WT和B6.C9-/-小鼠均随机分为LPS组(n=5)和对照组(n=3),实验重复3次.LPS组腹腔注射LPS(0111:B4)5 mg/kg,对照组注射等体积生理盐水,处理12 h.酶法检测血清ALT、AST水平,HE染色观察肝脏病理学和炎症细胞浸润情况.ELISA检测血清和肝脏组织抽提物中IL-1β、IL-8、TNF-α水平以及血清中可溶型MAC(sMAC)水平.IF观察肝脏组织中巨噬细胞、中性粒细胞浸润及MAC沉积.qRT-PCR检测肝脏组织IL-1β、IL-8、TNF-αmRNA水平.FACS检测肝脏单个核细胞中巨噬细胞及中性粒细胞比例.结果:LPS刺激后,B6.C9-/-小鼠血清中ALT、AST水平显著低于B6.WT小鼠(P<0.001),HE染色显示其肝脏组织中的病理损伤和炎症反应也明显轻于B6.WT小鼠.B6.C9-/-小鼠血清中IL-1β(P<0.01)、IL-8(P<0.0001)、TNF-α(P<0.0001)水平均显著低于B6.WT小鼠.B6.C9-/-小鼠肝脏中MAC沉积(P<0.01)及血清sMAC水平(P<0.05)低于B6.WT小鼠,肝脏组织抽提物中IL-1β(P<0.01)、IL-8(P<0.05)水平显著低于B6.WT小鼠,TNF-α水平无显著性差异.肝脏组织中IL-1β(P<0.05)mRNA水平低于B6.WT小鼠,而IL-8、TNF-αmRNA水平无显著差异.同时,肝脏单个核细胞中巨噬细胞及中性粒细胞比例也显著低于B6.WT小鼠(P<0.01).结论:补体C9缺陷通过下调MAC沉积抑制巨噬细胞和中性粒细胞浸润对LPS诱导的早期肝脏炎症反应和损伤起保护作用.
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