【摘 要】
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目的克隆人的era基因(简称Hera)并利用大肠杆菌进行表达. 方法 PCR扩增Hera基因,测序正确后克隆入大肠杆菌融合表达载体pGEX-4T3,受控于Ptac启动子,重组质粒pGEX-Hera以大肠
【机 构】
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第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
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目的克隆人的era基因(简称Hera)并利用大肠杆菌进行表达. 方法 PCR扩增Hera基因,测序正确后克隆入大肠杆菌融合表达载体pGEX-4T3,受控于Ptac启动子,重组质粒pGEX-Hera以大肠杆菌DH5α为宿主菌,用IPTG进行诱导表达. 结果克隆了Hera基因, 测序正确;含重组质粒pGEX-Hera的菌体诱导后在SDS-PAGE上出现一条新生蛋白带,相对分子质量为65 ku,占菌体总蛋白的23%. 结论成功扩增、克隆Hera基因,并在大肠杆菌中得到高效表达.
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