【摘 要】
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以蜂王幼虫冻干粉为原料,通过混菌发酵制备蜂王幼虫抗氧化肽并对其抗氧化活性、结构进行研究.以发酵液的多肽得率和蛋白酶活力为评价指标,通过单因素和响应面试验确定最佳发酵工艺,采用超滤对酶解粗多肽进行分离,测定了粗多肽的氨基酸组成以及各组分的体外抗氧化活性,并通过LC-MS/MS鉴定了抗氧化活性最好的超滤组分氨基酸序列.结果表明,混菌发酵蜂王幼虫制备抗氧化肽的最佳工艺为:枯草芽孢杆菌与黑曲霉的复配比为2.4:1,接种量6.5％,发酵时间57.5 h,该条件下多肽得率为15.49％,发酵体系中蛋白酶活力为133.
【机 构】
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华中农业大学 食品科技学院 环境食品学教育部重点实验室,湖北 武汉,430070;华中农业大学 食品科技学院 环境食品学教育部重点实验室,湖北 武汉,430070;武汉市蜂产品质量控制工程技术研究中心
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以蜂王幼虫冻干粉为原料,通过混菌发酵制备蜂王幼虫抗氧化肽并对其抗氧化活性、结构进行研究.以发酵液的多肽得率和蛋白酶活力为评价指标,通过单因素和响应面试验确定最佳发酵工艺,采用超滤对酶解粗多肽进行分离,测定了粗多肽的氨基酸组成以及各组分的体外抗氧化活性,并通过LC-MS/MS鉴定了抗氧化活性最好的超滤组分氨基酸序列.结果表明,混菌发酵蜂王幼虫制备抗氧化肽的最佳工艺为:枯草芽孢杆菌与黑曲霉的复配比为2.4:1,接种量6.5％,发酵时间57.5 h,该条件下多肽得率为15.49％,发酵体系中蛋白酶活力为133.55 U/mL.蜂王幼虫粗多肽的抗氧化氨基酸和疏水氨基酸含量分别为58.11％和47.2％.超滤分离得到5个组分F1～F5,其中分子质量<1 kDa的组分F1具有最优的抗氧化活性,其清除DPPH自由基和ABTS阳离子自由基的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值分别为(1.06±0.01)、(0.165±0.004)mg/mL,铁还原力OD700=0.389.组分F1通过LC-MS/MS分离鉴定并与Mascot多肽数据库比对得到9个可能的肽段,其分子质量在600～1100 Da.研究结果为蜂王幼虫的抗氧化肽产品开发提供实验依据.
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