论文部分内容阅读
[摘要] 目的 观察普伐他汀对培养人内皮祖细胞(EPC)数量、增殖、迁移、黏附及一氧化氮(NO)合成能力的影响。 方法 采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,贴壁筛选法培养内皮祖细胞,培养7 d后收集细胞并分别加入普伐他汀10 μmol/L及100 μmol/L,干预48 h, 免疫组化、荧光显微镜和流式细胞仪鉴定内皮祖细胞, 分别观察内皮祖细胞的数量、增殖迁移黏附能力、细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、mRNA 的表达以及培养液中NO的水平。 结果 普伐他汀组促进外周血内皮祖细胞扩增,并显著改善外周血内皮祖细胞的黏附、迁移、增殖以及eNOS mRNA 表达和NO 合成的能力。 结论 他汀类药物可增加培养人内皮祖细胞数量并改善其功能。
[关键词] 普伐他汀;内皮祖细胞;细胞培养
[中图分类号] R965 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2013)06-0016-03
他汀类药物是目前临床上最常见的血脂调节药物,广泛应用于动脉粥样硬化、高脂血症等疾病的防治,其作用机制为抑制胆固醇合成途径的HMG-CoA还原酶,从而降低低密度脂蛋白胆固醇水平。近年来研究发现,其除降脂作用外还存在非降脂作用,比如能改善血管内皮功能,上调成熟血管内皮细胞eNOS的活性和NO的合成[1]。内皮祖细胞(EPC)作为血管内皮的前体细胞,具有血管内皮细胞相似的特性,不仅参与新生血管形成(angiogenesis)以及出生后血管生成(vasculogenesis),而且参与损伤内皮的修复,在血管内皮功能中扮演着重要的角色。为进一步研究他汀类药物改善内皮功能的机制,本实验观察了普伐他汀对体外培养的内皮祖细胞数量和功能的影响。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
实验血样取自成年健康男性志愿者外周血约80 mL。普伐他汀由浙江大学医学院心血管病研究所赠予。MTT试剂、培养基M199(Sigma公司),FITC-抗钙黏着蛋白单克隆抗体(VE-Cadherin,Bender system TM 公司),PE-抗CD34单克隆抗体(CALTAG LABORATORIES),FITC-抗CD133单克隆抗体(R
[关键词] 普伐他汀;内皮祖细胞;细胞培养
[中图分类号] R965 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2013)06-0016-03
他汀类药物是目前临床上最常见的血脂调节药物,广泛应用于动脉粥样硬化、高脂血症等疾病的防治,其作用机制为抑制胆固醇合成途径的HMG-CoA还原酶,从而降低低密度脂蛋白胆固醇水平。近年来研究发现,其除降脂作用外还存在非降脂作用,比如能改善血管内皮功能,上调成熟血管内皮细胞eNOS的活性和NO的合成[1]。内皮祖细胞(EPC)作为血管内皮的前体细胞,具有血管内皮细胞相似的特性,不仅参与新生血管形成(angiogenesis)以及出生后血管生成(vasculogenesis),而且参与损伤内皮的修复,在血管内皮功能中扮演着重要的角色。为进一步研究他汀类药物改善内皮功能的机制,本实验观察了普伐他汀对体外培养的内皮祖细胞数量和功能的影响。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
实验血样取自成年健康男性志愿者外周血约80 mL。普伐他汀由浙江大学医学院心血管病研究所赠予。MTT试剂、培养基M199(Sigma公司),FITC-抗钙黏着蛋白单克隆抗体(VE-Cadherin,Bender system TM 公司),PE-抗CD34单克隆抗体(CALTAG LABORATORIES),FITC-抗CD133单克隆抗体(R