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[摘要] 目的 探讨溃疡性结肠炎（UC）患者体内新型IL因子表达。 方法 选取2014年1月～2016年12月收治的溃疡性结肠炎患者50例作为观察组，另选择我院同期健康体检者50例作为对照组，测定两组体内外周血清中白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-21（IL-21）、白细胞介素-22（IL-22）、白细胞介素-23（IL-23）等主要炎性因子含量及不同程度的UC患者体内IL因子的表达，并进行统计学分析。 结果 观察组患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于健康对照组，且差异有统计学意义（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于轻中度UC患者，且差异有统计学意义（P<0.05）；50例溃疡性结肠炎治疗后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表达水平明显低于治疗前，且差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 UC患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明显升高，与疾病活动度密切相关，可预测UC发展或评估治疗效果。
[关键词] 溃疡性结肠炎；炎性因子；IL-17；IL-21；IL-22；IL-23；表达；影响
[中图分类号] R574.62 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）13-223-03
[Abstract] Objective To investigate the expression of IL-1 in patients with ulcerative colitis（UC）. Methods 50 patients with ulcerative colitis admitted from January 2014 to December 2016 were selected as the observation group.50 patients in the same period were selected as the control group.The levels of interleukin-17（IL-17），interleukin-21（IL-21），interleukin-2（IL-22），interleukin-23（IL-23）and other major inflammatory factors，the expression of IL factor in patients was analyzed and analyzed statistically. Results The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in the serum of the observation group were significantly higher than those of the healthy control group （P<0.05）.The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in serum of patients with UC were significantly higher than those of mild to moderate UC patients，and the difference was statistically significant（P<0.05）.The expression of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in peripheral blood of patients with ulcerative colitis was significantly lower than that before treatment，and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in peripheral blood of patients with UC are significantly higher than those of UC，which can predict the development of UC or evaluate the therapeutic effect.
[Key words] Ulcerative colitis；Inflammatory factors；IL-17；IL-21；IL-22；IL-23；Expression；Influence
潰疡性结肠炎（ulcemtive colitis，UC）病变部位多在直肠和乙状结肠，有时也可以延伸至降结肠甚至遍及整个结肠，但病变仅局限于结肠粘膜和黏膜下层，具有原因不明、反复发作而且病程较长的特点。目前UC发病机制尚未明确.可能与感染、遗传和免疫等方面有关，其中炎症介质可能引发一系列免疫反应。本研究分别检测50例UC患者与50例健康者体内致炎细胞因子的表达，及不同程度的UC患者体内IL因子的表达，并进行分析，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
本研究选取我院2014年1月～2016年12月收治的50例溃疡性结肠炎患者，其中男28例，女22例；年龄21～69岁，平均（32.2±6.7）岁；病程2个月～10年，平均（4.1±2.8）年；轻度溃疡性结肠炎28例，中度溃疡性结肠炎22例；病变仅局限于直肠11例，病变累及直肠和乙状结肠20例，病变累及整个结肠19例。纳入标准：（1）经组织病理学检查均符合溃疡性结肠炎的相关诊断标准，均经消化道钡餐、电子胃镜及结肠镜、病理检查等确诊为溃疡性结肠炎；（2）停用一切影响UC的药物≥1周（包括激素、SASP、中药等）；（3）轻、中型UC，初发型、慢性复发型及慢性持续型；（4）处活动期，即疾病活动指数（DAI）≥3（采用改良型Mayo评分评价溃疡性结肠炎活动指数）。排除标准：（1）有严重心、肝、肾等重要脏器和血液、内分泌系统疾病；（2）有活动性胃、十二指肠溃疡；（3）消化道肿瘤；（4）有肠道切除手术；（5）孕妇、哺乳期妇女；（6）有水杨酸制剂及磺胺类药物过敏或过敏体质；（7）精神病。另选择我院同期健康体检者50例作为对照组，其中男60例，女40例；年龄22～68岁，平均（33.8±6.5）岁；两组患者的年龄、性别等一般资料比较无统计学意义（P>0.05），具有可比性。 1.2 治疗方法
患者给予柳氮磺吡啶（上海三维制药有限公司，H31020450）治疗，4次/d，1g/次，餐后口服，连续服用4周，4周后改为2g/d，再继续服用4周。在服药观察期间内应禁止服用糖皮质激素、抗生素、免疫抑制剂以及非甾体抗炎药等。而且1d之内的用药间隔不宜超过8h，以免引起消化道不耐受等现象。
1.3 实验方法
采用夹心酶联免疫吸附法定量检测血液炎性指标：参照Butzner等的CMDI、Dieleman评分标准进行结肠黏膜组织学损伤评分。RT-PCR法测定肠黏膜组织IL-17mRNA、IL-21mRNA、IL-22mRNA和IL-23mRNA水平：Western blot测定肠黏膜组织IL-17、IL-21、IL-22和IL-23蛋白表达水平：观察组所有患者均行溃疡性结肠炎疾病活动指数评估，见表1。
1.4 观察指标
观察两组患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子，并对50例UC患者治疗前后及不同程度的UC患者体内IL因子的表达进行分析。采血（采血前禁食24h），静置2h后，3000r/min离心10min，取上清，置于-20℃冰箱保存备用。IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子含量测定，严格按ELISA试剂盒说明操作。
1.5 统计学处理
将两组患者临床疗效、炎症因子水平变化和不良反应发生情况导人到数学分析软件SPSSl2.0中进行统计学分析处理，计量资料以（）表示，采用t检验，计数资料以百分比表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 溃疡性结肠炎与健康人新型IL因子表达水平比较
观察组患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于健康对照组，且差异有统计学意义（P<0.05），见表2。
2.2 不同程度UC患者外周血清IL因子表达水平比较
重度、中度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于轻度UC患者，且差异有统计学意义（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于中度UC患者，且差异有统计学意义（t=35.38，7.64，33.28，23.19，P<0.05），见表3。
2.3 50例溃疡性结肠炎治疗前后外周血清IL因子表达水平比较
50例溃疡性结肠炎治疗后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表达水平明显低于治疗前，且差异有统计学意义（P<0.05），见表4。
3 讨论
溃疡性结肠炎是一种临床常见疾病，病情发作反复，治疗后复发情况频繁[4]。目前对于其发病机制尚未明确.可能与感染、遗传和免疫等方面有关，其中炎症介质可能引发一系列免疫反应[5]。白细胞介素是细胞中最常见的炎症介质，在免疫过程中起着至关重要的作用[6]。本研究中发现观察组患者血清炎性因子均明显高于健康对照组，且差异有统计学意义（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于轻中度UC患者，且差异有统计学意义（P<0.05）；50例溃疡性结肠炎治疗后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表达水平明显低于治疗前，且差异有统计学意义（P<0.05）。IL-17主要由T细胞产生，属于抗炎因子在体液免疫中起着重要作用：IL-21由活化的CD4+T细胞分泌，参与调节B细胞增殖，协同IL-15促进骨髓前体细胞增殖和NK细胞增殖、分化和细胞毒活性[7]。IL-22是一个相对发现较晚的细胞因子，目前已被发现能诱导人角质形成细胞和成纤维样滑膜细胞（FLS）的增殖，从而导致自身免疫性疾病[8-12]。IL-23是IL-12细胞因子家族中新的一员，主要由活化的巨噬细胞及树突状细胞产生。由于IL-23在感染、炎症、自身免疫性疾病及肿瘤免疫中发挥重要的作用[13]。IL-8由巨噬细胞和单核细胞产生，属于促炎因子，在细胞免疫中发挥作用。细胞中促炎因子和抗炎因子的平衡相当重要，他们之间的平衡调节对于溃疡性结肠炎的发作具有一定影响[14-16]。目前对于溃疡性结肠炎临床上一般采用氨基水杨酸类药物治疗，其缓解作用显著，但是存在太多的不良反应。因此为溃疡性结肠炎患者提供一种新的治疗方案是目前临床上探讨的主要问题。前期研究发现具有清热泻火及收敛活血的中药能有效促进溃疡愈合，对于溃疡性结肠炎的疗效显著。柳氮磺胺吡啶在肠微生物作用下，其分解为5-氨基水杨酸和磺胺吡啶。5-氨基水杨酸有抗炎和免疫抑制作用，抑制急性发作，并延长缓解期，从而起到治疗的目的。
[参考文献]
[1] 康静静，姚华伟，梁宏德，等.细胞因子在炎症性肠病中的作用[J].中国细胞生物学学报，2011，33（2）：204-209.
[2] 张晓杰，王莹.儿童溃疡性结肠炎血清 IL-1、IL-6、IL-10 及TNF-α水平变化[J].中国妇幼保健，2015，30（20）：3413-3415.
[3] 童霞，骆成俊，许晓梅，等.美沙拉嗪联合双歧三联活菌对溃疡性结肠炎患者TNF-α、IL-8及IL-10水平的影响[J].现代生物医学进展，2015，15（23）：4534-4536.
[4] 易蕊，常娟，刘晓艳，等.TNF-α、IL-6及IL-8在不同程度溃疡性结肠炎患者血清中的表达及意义[J].现代生物医学进展，2015，15（14）：2641-2644.
[5] 王岩，杨立，刘威羽.益生菌对活动期溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜组织及IFN-γ、IL-12 表达的影响[J].贵阳医学院学报，2015，40（11）：1190-1193. [6] 唐巧珍，刘玉兰.溃疡性结肠炎和肠易激综合征结肠黏膜HBD-2、NF-kB、IL-6和IL-23的表达[J].中国现代医生，2013，51（22）：42-44.
[7] 冯锦山，王士群，陈平湖，等.溃疡性结肠炎患者血清IL-10、IL-13和IL-17水平与湿热证关系研究[J].时珍国医国药，2013，24（5）：1261-1262.
[8] 王海弘.溃疡性结肠炎患者血清IL-23、C-反应蛋白含量及临床意义[J].湖北民族学院学报（医学版），2013，30（3）：20-22.
[9] 谭海成.IL-23对溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞分泌IL-17、IFN-γ的影响及意义[J].成都医学院学报，2013，8（4）：455-457.
[10] 徐毅晖，杨元生，陈垦，等.IL-21/STAT3通路在溃疡性结肠炎小鼠发病中的表达及其意义[J].国际医药卫生导报，2012，18（22）：3235-3238.
[11] 王万卷，陈丽，王晓鹏，等.寻常型银屑病皮损中肿瘤坏死因子-a、基质金属蛋白酶-9及其抑制剂-I的表达[J].西安交通大学学报（医学版），2007，28（3）：322-324.
[12] Melgar S，Yeung MM，Bas A，et a1Over-expression of intedeukin 10 in InUcosal T cells of patients with active ulcerative colitis[J].Clin Exp immunol，2003，134：127-137.
[13] 庞艳华，郑长青，王铁淳，等.IL-4和IL-13在溃疡性结肠炎中的表达阴[J].胃肠病学和肝病学杂志，2005，14（4）：410-412.
[14] 王觅柱，邬彩虹，陈吉.溃疡性结肠炎患者血清IL-13、TNF-a和IL-10的表达及其意义[J].国际消化病杂志，2009，29（5）：362-364.
[15] Leach ST，Messina I，Lemberg DA，et a1.Local and systemic Interleukin-18 and interleukin-18-binding protein in children with inflammatory bowel disease[J].Inflamm Bowel Dis，2008，14：68-74.
[16] 于燕林.潰疡性结肠炎患者血清TNF-a和IL-10的临床观察[J].中国当代医药.2010，17（24）：79-80.
（收稿日期：2017-05-25）
[关键词] 溃疡性结肠炎；炎性因子；IL-17；IL-21；IL-22；IL-23；表达；影响
[中图分类号] R574.62 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）13-223-03
[Abstract] Objective To investigate the expression of IL-1 in patients with ulcerative colitis（UC）. Methods 50 patients with ulcerative colitis admitted from January 2014 to December 2016 were selected as the observation group.50 patients in the same period were selected as the control group.The levels of interleukin-17（IL-17），interleukin-21（IL-21），interleukin-2（IL-22），interleukin-23（IL-23）and other major inflammatory factors，the expression of IL factor in patients was analyzed and analyzed statistically. Results The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in the serum of the observation group were significantly higher than those of the healthy control group （P<0.05）.The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in serum of patients with UC were significantly higher than those of mild to moderate UC patients，and the difference was statistically significant（P<0.05）.The expression of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in peripheral blood of patients with ulcerative colitis was significantly lower than that before treatment，and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The levels of IL-17，IL-21，IL-22 and IL-23 in peripheral blood of patients with UC are significantly higher than those of UC，which can predict the development of UC or evaluate the therapeutic effect.
[Key words] Ulcerative colitis；Inflammatory factors；IL-17；IL-21；IL-22；IL-23；Expression；Influence
潰疡性结肠炎（ulcemtive colitis，UC）病变部位多在直肠和乙状结肠，有时也可以延伸至降结肠甚至遍及整个结肠，但病变仅局限于结肠粘膜和黏膜下层，具有原因不明、反复发作而且病程较长的特点。目前UC发病机制尚未明确.可能与感染、遗传和免疫等方面有关，其中炎症介质可能引发一系列免疫反应。本研究分别检测50例UC患者与50例健康者体内致炎细胞因子的表达，及不同程度的UC患者体内IL因子的表达，并进行分析，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
本研究选取我院2014年1月～2016年12月收治的50例溃疡性结肠炎患者，其中男28例，女22例；年龄21～69岁，平均（32.2±6.7）岁；病程2个月～10年，平均（4.1±2.8）年；轻度溃疡性结肠炎28例，中度溃疡性结肠炎22例；病变仅局限于直肠11例，病变累及直肠和乙状结肠20例，病变累及整个结肠19例。纳入标准：（1）经组织病理学检查均符合溃疡性结肠炎的相关诊断标准，均经消化道钡餐、电子胃镜及结肠镜、病理检查等确诊为溃疡性结肠炎；（2）停用一切影响UC的药物≥1周（包括激素、SASP、中药等）；（3）轻、中型UC，初发型、慢性复发型及慢性持续型；（4）处活动期，即疾病活动指数（DAI）≥3（采用改良型Mayo评分评价溃疡性结肠炎活动指数）。排除标准：（1）有严重心、肝、肾等重要脏器和血液、内分泌系统疾病；（2）有活动性胃、十二指肠溃疡；（3）消化道肿瘤；（4）有肠道切除手术；（5）孕妇、哺乳期妇女；（6）有水杨酸制剂及磺胺类药物过敏或过敏体质；（7）精神病。另选择我院同期健康体检者50例作为对照组，其中男60例，女40例；年龄22～68岁，平均（33.8±6.5）岁；两组患者的年龄、性别等一般资料比较无统计学意义（P>0.05），具有可比性。 1.2 治疗方法
患者给予柳氮磺吡啶（上海三维制药有限公司，H31020450）治疗，4次/d，1g/次，餐后口服，连续服用4周，4周后改为2g/d，再继续服用4周。在服药观察期间内应禁止服用糖皮质激素、抗生素、免疫抑制剂以及非甾体抗炎药等。而且1d之内的用药间隔不宜超过8h，以免引起消化道不耐受等现象。
1.3 实验方法
采用夹心酶联免疫吸附法定量检测血液炎性指标：参照Butzner等的CMDI、Dieleman评分标准进行结肠黏膜组织学损伤评分。RT-PCR法测定肠黏膜组织IL-17mRNA、IL-21mRNA、IL-22mRNA和IL-23mRNA水平：Western blot测定肠黏膜组织IL-17、IL-21、IL-22和IL-23蛋白表达水平：观察组所有患者均行溃疡性结肠炎疾病活动指数评估，见表1。
1.4 观察指标
观察两组患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子，并对50例UC患者治疗前后及不同程度的UC患者体内IL因子的表达进行分析。采血（采血前禁食24h），静置2h后，3000r/min离心10min，取上清，置于-20℃冰箱保存备用。IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子含量测定，严格按ELISA试剂盒说明操作。
1.5 统计学处理
将两组患者临床疗效、炎症因子水平变化和不良反应发生情况导人到数学分析软件SPSSl2.0中进行统计学分析处理，计量资料以（）表示，采用t检验，计数资料以百分比表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 溃疡性结肠炎与健康人新型IL因子表达水平比较
观察组患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于健康对照组，且差异有统计学意义（P<0.05），见表2。
2.2 不同程度UC患者外周血清IL因子表达水平比较
重度、中度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于轻度UC患者，且差异有统计学意义（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于中度UC患者，且差异有统计学意义（t=35.38，7.64，33.28，23.19，P<0.05），见表3。
2.3 50例溃疡性结肠炎治疗前后外周血清IL因子表达水平比较
50例溃疡性结肠炎治疗后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表达水平明显低于治疗前，且差异有统计学意义（P<0.05），见表4。
3 讨论
溃疡性结肠炎是一种临床常见疾病，病情发作反复，治疗后复发情况频繁[4]。目前对于其发病机制尚未明确.可能与感染、遗传和免疫等方面有关，其中炎症介质可能引发一系列免疫反应[5]。白细胞介素是细胞中最常见的炎症介质，在免疫过程中起着至关重要的作用[6]。本研究中发现观察组患者血清炎性因子均明显高于健康对照组，且差异有统计学意义（P<0.05）；重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明顯高于轻中度UC患者，且差异有统计学意义（P<0.05）；50例溃疡性结肠炎治疗后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表达水平明显低于治疗前，且差异有统计学意义（P<0.05）。IL-17主要由T细胞产生，属于抗炎因子在体液免疫中起着重要作用：IL-21由活化的CD4+T细胞分泌，参与调节B细胞增殖，协同IL-15促进骨髓前体细胞增殖和NK细胞增殖、分化和细胞毒活性[7]。IL-22是一个相对发现较晚的细胞因子，目前已被发现能诱导人角质形成细胞和成纤维样滑膜细胞（FLS）的增殖，从而导致自身免疫性疾病[8-12]。IL-23是IL-12细胞因子家族中新的一员，主要由活化的巨噬细胞及树突状细胞产生。由于IL-23在感染、炎症、自身免疫性疾病及肿瘤免疫中发挥重要的作用[13]。IL-8由巨噬细胞和单核细胞产生，属于促炎因子，在细胞免疫中发挥作用。细胞中促炎因子和抗炎因子的平衡相当重要，他们之间的平衡调节对于溃疡性结肠炎的发作具有一定影响[14-16]。目前对于溃疡性结肠炎临床上一般采用氨基水杨酸类药物治疗，其缓解作用显著，但是存在太多的不良反应。因此为溃疡性结肠炎患者提供一种新的治疗方案是目前临床上探讨的主要问题。前期研究发现具有清热泻火及收敛活血的中药能有效促进溃疡愈合，对于溃疡性结肠炎的疗效显著。柳氮磺胺吡啶在肠微生物作用下，其分解为5-氨基水杨酸和磺胺吡啶。5-氨基水杨酸有抗炎和免疫抑制作用，抑制急性发作，并延长缓解期，从而起到治疗的目的。
[参考文献]
[1] 康静静，姚华伟，梁宏德，等.细胞因子在炎症性肠病中的作用[J].中国细胞生物学学报，2011，33（2）：204-209.
[2] 张晓杰，王莹.儿童溃疡性结肠炎血清 IL-1、IL-6、IL-10 及TNF-α水平变化[J].中国妇幼保健，2015，30（20）：3413-3415.
[3] 童霞，骆成俊，许晓梅，等.美沙拉嗪联合双歧三联活菌对溃疡性结肠炎患者TNF-α、IL-8及IL-10水平的影响[J].现代生物医学进展，2015，15（23）：4534-4536.
[4] 易蕊，常娟，刘晓艳，等.TNF-α、IL-6及IL-8在不同程度溃疡性结肠炎患者血清中的表达及意义[J].现代生物医学进展，2015，15（14）：2641-2644.
[5] 王岩，杨立，刘威羽.益生菌对活动期溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜组织及IFN-γ、IL-12 表达的影响[J].贵阳医学院学报，2015，40（11）：1190-1193. [6] 唐巧珍，刘玉兰.溃疡性结肠炎和肠易激综合征结肠黏膜HBD-2、NF-kB、IL-6和IL-23的表达[J].中国现代医生，2013，51（22）：42-44.
[7] 冯锦山，王士群，陈平湖，等.溃疡性结肠炎患者血清IL-10、IL-13和IL-17水平与湿热证关系研究[J].时珍国医国药，2013，24（5）：1261-1262.
[8] 王海弘.溃疡性结肠炎患者血清IL-23、C-反应蛋白含量及临床意义[J].湖北民族学院学报（医学版），2013，30（3）：20-22.
[9] 谭海成.IL-23对溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞分泌IL-17、IFN-γ的影响及意义[J].成都医学院学报，2013，8（4）：455-457.
[10] 徐毅晖，杨元生，陈垦，等.IL-21/STAT3通路在溃疡性结肠炎小鼠发病中的表达及其意义[J].国际医药卫生导报，2012，18（22）：3235-3238.
[11] 王万卷，陈丽，王晓鹏，等.寻常型银屑病皮损中肿瘤坏死因子-a、基质金属蛋白酶-9及其抑制剂-I的表达[J].西安交通大学学报（医学版），2007，28（3）：322-324.
[12] Melgar S，Yeung MM，Bas A，et a1Over-expression of intedeukin 10 in InUcosal T cells of patients with active ulcerative colitis[J].Clin Exp immunol，2003，134：127-137.
[13] 庞艳华，郑长青，王铁淳，等.IL-4和IL-13在溃疡性结肠炎中的表达阴[J].胃肠病学和肝病学杂志，2005，14（4）：410-412.
[14] 王觅柱，邬彩虹，陈吉.溃疡性结肠炎患者血清IL-13、TNF-a和IL-10的表达及其意义[J].国际消化病杂志，2009，29（5）：362-364.
[15] Leach ST，Messina I，Lemberg DA，et a1.Local and systemic Interleukin-18 and interleukin-18-binding protein in children with inflammatory bowel disease[J].Inflamm Bowel Dis，2008，14：68-74.
[16] 于燕林.潰疡性结肠炎患者血清TNF-a和IL-10的临床观察[J].中国当代医药.2010，17（24）：79-80.
（收稿日期：2017-05-25）