【摘 要】
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目的利用人工合成多肽制备针对人源、鼠源fgl2凝血酶原酶(hfgl2、mfgl2)的特异性多克隆抗体,以期用于与fgl2表达异常密切相关的疾病的研究和诊治.方法根据mfgl2、hfgl2基因编
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目的利用人工合成多肽制备针对人源、鼠源fgl2凝血酶原酶(hfgl2、mfgl2)的特异性多克隆抗体,以期用于与fgl2表达异常密切相关的疾病的研究和诊治.方法根据mfgl2、hfgl2基因编码的氨基酸序列合成多肽3(Pep3)和多肽4(Pep4),并用化学方法与匙孔血蓝蛋白(KLH)连接,纯品Pep3-KLH和Pep4-KLH免疫动物,所制备的抗血清用ELISA、Western blot和前凝血质活性(PCA)实验鉴定,并采用免疫组化法应用于乙型肝炎患者肝组织中hfgl2的检测.结果 ELISA检测表明,所制备的抗血清可分别与Pep3和Pep4发生特异性免疫反应;Western blot结果显示,抗血清可识别MHV-3感染BALB/cJ小鼠腹腔巨噬细胞特异性条带,相对分子质量(Mr)为65×103;PCA实验提示,抗血清具有中和mfgl2分子酶活性的作用.对病毒性乙型肝炎患者肝组织免疫组织化学染色发现hfgl2仅在重型乙型肝炎患者高表达,而在慢性乙型肝炎和肝硬化患者的肝组织中无表达.结论所制备的fgl2的多肽抗体(多克隆抗体)可识别mfgl2和hfgl2分子,具有与抗原特异性结合、中和其酶活性的特征,为深入研究这一新发现的分子提供了有力的科学手段.
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