研究胆碱能受体激动剂对天疱疮棘层松解的逆转作用及其机制。
方法将HaCaT细胞与寻常型天疱疮IgG（PV-IgG）共培养建成天疱疮细胞模型后，再加入胆碱能受体激动剂卡巴胆碱共培养，以PV-IgG诱导的天疱疮细胞模型作为对照，通过细胞解离实验定量分析卡巴胆碱对棘层松解的逆转情况，用免疫荧光方法定性观察桥粒蛋白变化；分别用RIPA和Triton X-100裂解细胞，得到总蛋白和胞质蛋白，用蛋白免疫印迹灰度值定性分析HaCaT细胞表面与黏附相关的桥粒芯蛋白3（Dsg3）、桥斑珠蛋白（PG）的变化，不同时间点p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、表皮生长因子受体（EGFR）的磷酸化水平；用定量聚合酶链反应（qPCR）检测上述细胞表面蛋白在mRNA水平的变化；通过免疫共沉淀方法定性分析Dsg3与PG相互作用的变化情况。
结果PV-IgG组细胞碎片数为46.67±2.03，卡巴胆碱组为18.67±2.52，两组比较，t=11.22，P<0.01；免疫荧光实验发现，卡巴胆碱可以逆转PV-IgG所致的桥粒分子内化。在天疱疮细胞模型中，细胞总的Dsg3和PG含量下降，非桥粒部分的Dsg3下降，非桥粒PG含量增加，且Dsg3与PG的相互作用减弱，加入卡巴胆碱后可逆转上述变化。卡巴胆碱也可使Dsg3 mRNA的相对表达量（2-ΔΔCt）由1.428±0.215增加至4.974±0.948（t=3.65，P=0.01），PG mRNA的相对表达量由1.563±0.247增加至13.420±1.715（t=6.85，P<0.01）。磷酸化实验中，卡巴胆碱可以抑制EGFR磷酸化，而对p38 MAPK磷酸化无明显影响。
结论胆碱能受体激动剂卡巴胆碱具有逆转棘层松解的作用，这种逆转作用的机制可能包括：抑制Dsg3和PG内化并增加其表达，增强Dsg3与PG的相互作用，抑制棘层松解关键信号EGFR的磷酸化。