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摘 要：本研究旨在评价黄檀叶甲醇提取物的镇痛，抗炎作用，为其使用提供科学依据。方法 对其甲醇提取物进行植物化学筛选并进行口服半数致死剂量的考察。使用醋酸诱发的扭体反应和小鼠热板法进行镇痛活性实验，使用角叉菜胶诱导的大鼠爪水肿进行抗炎活性实验。结果 发现其甲醇提取物含有生物碱，类黄酮，鞣质，皂苷，强心苷和三萜，口服半数致死剂量在5000 mg/kg以上。另外，其甲醇提取物在一定浓度下能明显抑制炎症发生和醋酸致小鼠扭体反应，并对热板法致小鼠痛阈值有显著提高。结论 在测试的剂量下所获得的结果表明黄檀叶甲醇提取物具有潜在的止痛，抗炎作用。
摘 要：黄檀叶甲醇；镇痛；抗炎
前言
黄檀属植物是豆科中的大型树木，灌木，藤本植物。它广泛分布在世界热带和亚热带地区，并由200多个物种组成[1]。黄檀是一种高2-3米的非洲灌木，花白色或粉红色，生在疏松的叶腋或终末圆锥花序中，长15厘米，广泛分布在尼日利亚北部。常用的部分是叶子，茎皮和根。
世界大部分人口依靠传统医药如草药治疗各种疾病。现代医学源自草药传统[2]。根据国际疼痛研究协会（IASP），疼痛是与实际或潜在的组织损伤或根据这种损伤的描述所相关的不愉快，感觉和情绪的体验。它也可以被定义为在大脑中由有害刺激产生的神经冲动的意识效果[3]。对疼痛的感知可能受到几种心理因素的影响，如注意力，记忆或学习过程，思维，信仰，情绪，行为反应和应对能力[5]。
炎症是身体去除有害刺激物并启动组织愈合过程的防御机制，但如果不加以控制，它会导致某些疾病的发作，如血管舒缩、类风湿性关节炎和动脉粥样硬化。它的特点是发红，肿胀，发热和疼痛以及功能丧失。发热定义为核心体温升高超过正常值。在正常成年人中，平均口腔温度为37±1℃（98.6。F）。发烧可能是由于感染，炎症，或任何组织损伤和疾病状态。它作为感染，恶性肿瘤或其他疾病状态的次要影响。
材料和方法
2. 药物和化学
冰醋酸，甲醇，10%福尔马林溶液，角叉菜胶（北京博奥拓达科技有限公司），阿司匹林（沈阳奥吉娜药业有限公司），吗啡（德国格兰泰有限公司）。
2. 实验动物
重量分别为100-150 g的Wistar大鼠和20-25 g的小鼠，由本校动物房提供。允许动物自由获取标准饲料和随意饮水。它们被保存在装满锯屑的清洁笼中，每三天更换一次垫料。该研究按照实验动物使用和护理政策的道德准则进行。
2.3 植物材料
D.saxatilis的叶子于2017年8月在海南省收集。该植物经本校药学实验室鉴定。
2.4 植物提取物的制备
将收集的叶子风干两周，并用研钵和研杵将其捣碎成粉末状。使用无水甲醇进行冷浸提取。将200 g粉末倒入烧瓶中，加入1000 mL溶剂，间歇振荡保持48小时，然后过滤。将提取物在蒸发器中减压，并控制温度在40-60℃下将溶剂蒸发至干燥。
2.5 植物化学的筛选
使用简单的化学试验对其甲醇提取物进行植物化学筛选，以检测文献中所详述的化学成分存在与否。
2.6 急性毒性研究（LD50测定）
采用Lorke [8]方法确定提取物的半数致死剂量。该研究分两个阶段进行，动物（小鼠和大鼠）在施用提取物之前被剥夺食物过夜。在阶段1中，使用三组，每组三只动物进行试验。提取物以几何式增加剂量（10 mg/kg，100 mg/ kg和1000 mg/kg）进行口服给药。给药后4小时观察处理的动物的毒性征兆。24小时后，当没有发生死亡时，开始第2阶段。在阶段2中，三组各取一只动物以几何式增加的剂量（1600 mg/kg，2900 mg/kg和5000 mg/ kg）进行口服给药。然后观察动物在前4小时的毒性迹象和24小时的死亡率。
2.7镇痛实验研究
2.7. 醋酸致小鼠扭体实验
按照李安举[9]，冯紫薇 [10]描述的醋酸诱导的扭体法来评价镇痛活性。扭動被定义为伸展，对一侧的张力，后腿的伸展，腹部的收缩，使得小鼠的腹部接触地板，躯体转向[11]。将30只雌雄各半的小鼠分成5组，1和2组作为阴性对照（蒸馏水10 mL/kg）和阳性对照（阿司匹林300 mg/kg），而3，4和5组分别接受250 mg/kg，500 mg/kg和1000 mg/kg的提取物。所有药物都进行口服给药。处理60分钟后，小鼠腹膜内接受0.6%醋酸（10 mL/kg）以诱发疼痛。在注射醋酸注射5分钟后，观察15分钟内每只小鼠的扭动次数并计数。使用下面的公式计算抑制百分比。
抑制率%=[（对照组扭体次数-给药组扭体次数）/对照扭体次数]
2.7. 热板实验法
按照李安举[9]，冯紫薇 [10]描述的热板试验法来评价镇痛活性。小鼠和大鼠的爪子在不损害皮肤的温度下对热量非常敏感，对此，它们的反应是跳跃，撤回爪子和舔爪子。热板的温度设定为55±1℃。在实验前12小时，30只雌雄各半的小鼠禁食12小时，并分成5组，1和2组作为阴性对照（蒸馏水10 mL/kg）和阳性对照（吗啡10 mg/kg），3，4和5组分别接受250 mg/kg，500 mg/kg和1000 mg/kg的提取物。所有药物都进行口服给药。将动物单独放置在热板上，直到发生舔足或跳跃，通过秒表记录处理后30，60，90和120分钟的时间。
2.8抗炎实验研究：
2.8.1角叉菜胶诱导的大鼠爪水肿模型
使用Edayadulla N[12]描述的方法进行抗炎研究。将30只Wistar大鼠分为5组，其中1和2组作为阴性对照（蒸馏水10 ml/kg）和阳性对照组（阿司匹林300 mg/kg），而3，4，5组接受250 mg/kg，500 mg/kg和1000 mg/kg的提取物。在角叉菜胶注射前1小时进行给药处理。利用生理盐水将角叉菜胶制备成浓度为1%，然后在大鼠的足下注射0.1mL配置好的角叉菜胶溶液。在注射角叉菜胶的0，1，2，3，4和5小时后，用爪尺寸数字游标卡尺进行测量。 2.9 数据分析
结果表示为x±s，并以图表和表格形式表示。组间进行t 检验分析，SPSS22.0自动处理。
3 结果
（一）saxatilis叶的甲醇提取物的产率为22.8%。植物化学筛选揭示了生物碱，类黄酮，强心苷，单宁，三萜和皂甙的存在。
3. 急性毒理实验
由于在实验的两个阶段都没有发生死亡，故小鼠和大鼠的口服半数致死剂量均大于5000 mg/kg。
3. 镇痛实验
3.2. 对醋酸致小鼠扭体反应的影响
该提取物以剂量依赖性方式显著减少由醋酸引起的扭体次数（表1），p<0.001。在给予250 mg/kg和1000 mg/kg提取物时所观察到的效果强于500 mg/kg的剂量。在1000 mg/kg组中观察到的效果与标准药物相当。
3.2. 对小鼠热板致痛实验的影响
不同剂量甲醇提取物显着增加反应时间（图1），p<0.05。将每组0分钟作为对照并与其他时间间隔进行比较。在30分钟时，500 mg/kg和1000 mg/kg组提取物的反应时间显著增加。所有给药组的结果如图1所示。
3.3 抗炎实验
3.3. 角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
如图2所示，提取物以不同的剂量降低大鼠爪尺寸，但不具有统计学显著性。将每组0小时作为对照，并与其他时间进行比较。与第一小时相比，第二小时的爪尺寸有统计学上的显著增加；与蒸馏水组的第二小時（峰值增加）相比，第四小时和第五小时显著减少。当0时间与阳性对照组的其他时间比较时，爪尺寸没有统计学的显著增加或减少。在250 mg/kg组中，在第三小时观察到峰值增加，这也具有统计学显著性。在500 mg/kg组中，在第一小时观察到爪尺寸的峰值增加，p<0.05。而在1000 mg/kg组中，与0小时对比，在所有小时中爪尺寸均有统计学显著增加。
4 结论
发现D.saxatilis叶的甲醇提取物具有几种生物活性成分，包括类黄酮，皂苷，鞣质，强心苷等等，且与有效的药理活性相关。发现该提取物具有较好的镇痛和抗炎作用。这支持了传统使用植物治疗牙痛的说法。
参考文献
[1] 李安举，张恒龙，李继军.通塞活络片活血化瘀、降脂、镇痛、抗炎作用的实验研究[J].中国中医药科技，2010，17（5）：397-398
[2] Mishra，D.，Ghosh，G.，Kumar，P.S.，Panda，P.K.，2011.An experimental study of analgesic activity of selective Cox- inhibitor with conventional NSAIDs.Asian J.Pharm.Clin.Res.4（1），0974–2441.
[3] 程友斌，潘洪林.金荞麦抗炎活性部位筛选研究[J].时珍国医国药，2009，20（9）：2219-2220.
（作者单位：辽宁科技学院）
摘 要：黄檀叶甲醇；镇痛；抗炎
前言
黄檀属植物是豆科中的大型树木，灌木，藤本植物。它广泛分布在世界热带和亚热带地区，并由200多个物种组成[1]。黄檀是一种高2-3米的非洲灌木，花白色或粉红色，生在疏松的叶腋或终末圆锥花序中，长15厘米，广泛分布在尼日利亚北部。常用的部分是叶子，茎皮和根。
世界大部分人口依靠传统医药如草药治疗各种疾病。现代医学源自草药传统[2]。根据国际疼痛研究协会（IASP），疼痛是与实际或潜在的组织损伤或根据这种损伤的描述所相关的不愉快，感觉和情绪的体验。它也可以被定义为在大脑中由有害刺激产生的神经冲动的意识效果[3]。对疼痛的感知可能受到几种心理因素的影响，如注意力，记忆或学习过程，思维，信仰，情绪，行为反应和应对能力[5]。
炎症是身体去除有害刺激物并启动组织愈合过程的防御机制，但如果不加以控制，它会导致某些疾病的发作，如血管舒缩、类风湿性关节炎和动脉粥样硬化。它的特点是发红，肿胀，发热和疼痛以及功能丧失。发热定义为核心体温升高超过正常值。在正常成年人中，平均口腔温度为37±1℃（98.6。F）。发烧可能是由于感染，炎症，或任何组织损伤和疾病状态。它作为感染，恶性肿瘤或其他疾病状态的次要影响。
材料和方法
2. 药物和化学
冰醋酸，甲醇，10%福尔马林溶液，角叉菜胶（北京博奥拓达科技有限公司），阿司匹林（沈阳奥吉娜药业有限公司），吗啡（德国格兰泰有限公司）。
2. 实验动物
重量分别为100-150 g的Wistar大鼠和20-25 g的小鼠，由本校动物房提供。允许动物自由获取标准饲料和随意饮水。它们被保存在装满锯屑的清洁笼中，每三天更换一次垫料。该研究按照实验动物使用和护理政策的道德准则进行。
2.3 植物材料
D.saxatilis的叶子于2017年8月在海南省收集。该植物经本校药学实验室鉴定。
2.4 植物提取物的制备
将收集的叶子风干两周，并用研钵和研杵将其捣碎成粉末状。使用无水甲醇进行冷浸提取。将200 g粉末倒入烧瓶中，加入1000 mL溶剂，间歇振荡保持48小时，然后过滤。将提取物在蒸发器中减压，并控制温度在40-60℃下将溶剂蒸发至干燥。
2.5 植物化学的筛选
使用简单的化学试验对其甲醇提取物进行植物化学筛选，以检测文献中所详述的化学成分存在与否。
2.6 急性毒性研究（LD50测定）
采用Lorke [8]方法确定提取物的半数致死剂量。该研究分两个阶段进行，动物（小鼠和大鼠）在施用提取物之前被剥夺食物过夜。在阶段1中，使用三组，每组三只动物进行试验。提取物以几何式增加剂量（10 mg/kg，100 mg/ kg和1000 mg/kg）进行口服给药。给药后4小时观察处理的动物的毒性征兆。24小时后，当没有发生死亡时，开始第2阶段。在阶段2中，三组各取一只动物以几何式增加的剂量（1600 mg/kg，2900 mg/kg和5000 mg/ kg）进行口服给药。然后观察动物在前4小时的毒性迹象和24小时的死亡率。
2.7镇痛实验研究
2.7. 醋酸致小鼠扭体实验
按照李安举[9]，冯紫薇 [10]描述的醋酸诱导的扭体法来评价镇痛活性。扭動被定义为伸展，对一侧的张力，后腿的伸展，腹部的收缩，使得小鼠的腹部接触地板，躯体转向[11]。将30只雌雄各半的小鼠分成5组，1和2组作为阴性对照（蒸馏水10 mL/kg）和阳性对照（阿司匹林300 mg/kg），而3，4和5组分别接受250 mg/kg，500 mg/kg和1000 mg/kg的提取物。所有药物都进行口服给药。处理60分钟后，小鼠腹膜内接受0.6%醋酸（10 mL/kg）以诱发疼痛。在注射醋酸注射5分钟后，观察15分钟内每只小鼠的扭动次数并计数。使用下面的公式计算抑制百分比。
抑制率%=[（对照组扭体次数-给药组扭体次数）/对照扭体次数]
2.7. 热板实验法
按照李安举[9]，冯紫薇 [10]描述的热板试验法来评价镇痛活性。小鼠和大鼠的爪子在不损害皮肤的温度下对热量非常敏感，对此，它们的反应是跳跃，撤回爪子和舔爪子。热板的温度设定为55±1℃。在实验前12小时，30只雌雄各半的小鼠禁食12小时，并分成5组，1和2组作为阴性对照（蒸馏水10 mL/kg）和阳性对照（吗啡10 mg/kg），3，4和5组分别接受250 mg/kg，500 mg/kg和1000 mg/kg的提取物。所有药物都进行口服给药。将动物单独放置在热板上，直到发生舔足或跳跃，通过秒表记录处理后30，60，90和120分钟的时间。
2.8抗炎实验研究：
2.8.1角叉菜胶诱导的大鼠爪水肿模型
使用Edayadulla N[12]描述的方法进行抗炎研究。将30只Wistar大鼠分为5组，其中1和2组作为阴性对照（蒸馏水10 ml/kg）和阳性对照组（阿司匹林300 mg/kg），而3，4，5组接受250 mg/kg，500 mg/kg和1000 mg/kg的提取物。在角叉菜胶注射前1小时进行给药处理。利用生理盐水将角叉菜胶制备成浓度为1%，然后在大鼠的足下注射0.1mL配置好的角叉菜胶溶液。在注射角叉菜胶的0，1，2，3，4和5小时后，用爪尺寸数字游标卡尺进行测量。 2.9 数据分析
结果表示为x±s，并以图表和表格形式表示。组间进行t 检验分析，SPSS22.0自动处理。
3 结果
（一）saxatilis叶的甲醇提取物的产率为22.8%。植物化学筛选揭示了生物碱，类黄酮，强心苷，单宁，三萜和皂甙的存在。
3. 急性毒理实验
由于在实验的两个阶段都没有发生死亡，故小鼠和大鼠的口服半数致死剂量均大于5000 mg/kg。
3. 镇痛实验
3.2. 对醋酸致小鼠扭体反应的影响
该提取物以剂量依赖性方式显著减少由醋酸引起的扭体次数（表1），p<0.001。在给予250 mg/kg和1000 mg/kg提取物时所观察到的效果强于500 mg/kg的剂量。在1000 mg/kg组中观察到的效果与标准药物相当。
3.2. 对小鼠热板致痛实验的影响
不同剂量甲醇提取物显着增加反应时间（图1），p<0.05。将每组0分钟作为对照并与其他时间间隔进行比较。在30分钟时，500 mg/kg和1000 mg/kg组提取物的反应时间显著增加。所有给药组的结果如图1所示。
3.3 抗炎实验
3.3. 角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响
如图2所示，提取物以不同的剂量降低大鼠爪尺寸，但不具有统计学显著性。将每组0小时作为对照，并与其他时间进行比较。与第一小时相比，第二小时的爪尺寸有统计学上的显著增加；与蒸馏水组的第二小時（峰值增加）相比，第四小时和第五小时显著减少。当0时间与阳性对照组的其他时间比较时，爪尺寸没有统计学的显著增加或减少。在250 mg/kg组中，在第三小时观察到峰值增加，这也具有统计学显著性。在500 mg/kg组中，在第一小时观察到爪尺寸的峰值增加，p<0.05。而在1000 mg/kg组中，与0小时对比，在所有小时中爪尺寸均有统计学显著增加。
4 结论
发现D.saxatilis叶的甲醇提取物具有几种生物活性成分，包括类黄酮，皂苷，鞣质，强心苷等等，且与有效的药理活性相关。发现该提取物具有较好的镇痛和抗炎作用。这支持了传统使用植物治疗牙痛的说法。
参考文献
[1] 李安举，张恒龙，李继军.通塞活络片活血化瘀、降脂、镇痛、抗炎作用的实验研究[J].中国中医药科技，2010，17（5）：397-398
[2] Mishra，D.，Ghosh，G.，Kumar，P.S.，Panda，P.K.，2011.An experimental study of analgesic activity of selective Cox- inhibitor with conventional NSAIDs.Asian J.Pharm.Clin.Res.4（1），0974–2441.
[3] 程友斌，潘洪林.金荞麦抗炎活性部位筛选研究[J].时珍国医国药，2009，20（9）：2219-2220.
（作者单位：辽宁科技学院）