【摘 要】
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目的 分析某院临床分离的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）耐药情况及耐药基因，指导临床规范使用抗菌药物。方法 收集该院2015—2019年临床分离的2416株肺炎克雷伯菌，使用VITEK-2 Compact系统对临床分离株进行细菌鉴定，药敏试验采用MIC法和K-B纸片扩散法，采用WHONET 5.6软件对菌株的标本来源、科室分布、检出率及耐药率进行统计，采用SPSS
【基金项目】
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安徽高校自然科学研究项目资助（No.KJ2019A0253）；
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目的 分析某院临床分离的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）耐药情况及耐药基因，指导临床规范使用抗菌药物。方法 收集该院2015—2019年临床分离的2416株肺炎克雷伯菌，使用VITEK-2 Compact系统对临床分离株进行细菌鉴定，药敏试验采用MIC法和K-B纸片扩散法，采用WHONET 5.6软件对菌株的标本来源、科室分布、检出率及耐药率进行统计，采用SPSS 26.0软件对5年期间菌株的检出率、耐药率进行比较及趋势分析，选取2019年内科重症监护病房（Intensive careunit,ICU）的19株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistantKlebsiellapneumoniae,CR-KP），通过二代测序平台对其进行全基因组测序（whole genome sequencing, WGS），运用丹麦技术大学（DTU）基因组流行病学中心（CGE）（https://cge.cbs.dtu.dk/services/ResFinder/）的ResFinder 4.0工具进行耐药基因筛查，运用MORPHEUS（https://software.broadinstitute.org/morpheus/）在线制作耐药基因热图。结果 2015—2019年临床标本共分离出2416株KP，主要来自痰液、尿液，分别占51.7%（1249/2416）、11.3%（273/2416），科室主要分布于内科ICU、外科ICU，分别占23.2%（561/2416）、19.1%（461/2416）。每年KP的分离率呈上升趋势(χ趋势~2=18.190,P<0.001)，其对常用抗菌药物的耐药率呈逐年升高趋势，除对替加环素的耐药率无法统计外，对其他各类抗菌药物的耐药率差异均有统计学意义（P<0.001），对亚胺培南、美罗培南耐药率分别从2015年的2.9%、3.0%上升至2019年的16.0%、13.7%。5年间共检出354株CR-KP，主要来自痰液、尿液，分别占43.8%（155/354）、10.7%（38/354），分布较高的科室为外科ICU、内科ICU，分别占14.4%（51/354）、10.2%（36/354），每年的检出率呈上升趋势(χ趋势~2=46.176,P<0.001)，其对各类抗菌药物的耐药率呈逐年升高趋势，除对庆大霉素的耐药率差异无统计学意义（P=0.105）、对替加环素的耐药率差异无法统计外，对其他各类抗菌药物的耐药率差异均有统计学意义（P<0.05）。采用WGS技术对19株CR-KP进行分析，共筛查出15种耐药基因，主要包括β-内酰胺酶耐药基因(blaKPC-2)、喹诺酮类耐药基因（qnrS1）、磷霉素耐药基因（fosA）、四环素耐药基因（tetA）、氯霉素耐药基因（catA2）以及氨基糖苷类耐药基因（aadA2b、rmtB）等。结论 该院KP、CR-KP的耐药情况日趋严重，CR-KP同时携带多种耐药基因，耐药表型多样化。运用WGS结合生物信息学分析技术研究细菌耐药机制，有助于耐药菌防控措施的精准实施，未来将成为耐药菌研究的主流技术之一。
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