【摘 要】
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目的设计并筛选能高效抑制创伤性关节炎滑膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的最佳干扰序列,为进一步研究TNF-α基因对创伤性关节炎的临床应用奠定基础。方法根据人源TNF-αm
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目的设计并筛选能高效抑制创伤性关节炎滑膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的最佳干扰序列,为进一步研究TNF-α基因对创伤性关节炎的临床应用奠定基础。方法根据人源TNF-αmRNA的序列,设计合成3组不同的且能干扰TNF-α基因表达的小型干扰RNA(siRNA)序列,将其转染人创伤性关节炎滑膜细胞,与阴性对照组(NC组)比较。培养48h后,采用实时灾光定量PCR(RT-PCR)检测滑膜细胞TNF-αmRNA表达水平,采用ELISA法检测细胞上清液TNF-α表达水平。结果与NC组相比,3组siRNA中有2组siRNA可有效使人滑膜细胞中TNF-αmRNA表达减少(P<0.01);同时细胞上清液中TNF-α分泌量下降,与NC组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功设计合成了特异且高效阻断TNF-α表达的siRNA。
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