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目的
建立肠道病毒71型(enterovirus 71，EV71)抗原的定量检测方法，用于EV71疫苗生产过程中EV71抗原含量的监测。
方法用EV71抗原免疫新西兰兔制备抗EV71多克隆抗体，纯化后用辣根过氧化物酶标记。采用双抗体夹心ELISA法建立抗原检测系统。以EV71国家抗原标准品为定量标准，建立剂量反应曲线，确定该方法的线性范围和定量限，并对该方法的特异性、精密度、准确性、稳定性及适用性等进行验证。
结果建立的ELISA法的线性范围为5～80 U/ml，定量限为5 U/ml，线性决定系数均大于0.990 0；不同浓度样品回收率为85.0%～110.0%，变异系数均小于15%；置于2～8 ℃及37 ℃ 3、6 d的抗体包被板对不同浓度样品的检测值变异系数均小于15%；该方法可特异性检测EV71原液，与非EV71样品无交叉反应。
结论建立了EV71抗原定量检测方法，为EV71疫苗生产工艺过程的质量控制奠定了基础。