【摘 要】
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为明确猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)合成的病毒蛋白抑制Ⅰ型干扰素(IFN)产生的分子机制,本研究将PHEV接种RAW264.7细胞后利用放线菌酮药物处理,结果显示,随着药物对病毒蛋白合
【机 构】
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吉林大学动物医学学院,吉林长春130062;吉林省畜牧兽医科学研究院,吉林长春130062;青岛易邦生物工程有限公司动物基因工程疫苗国家重点实验室,山东青岛266144
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为明确猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)合成的病毒蛋白抑制Ⅰ型干扰素(IFN)产生的分子机制,本研究将PHEV接种RAW264.7细胞后利用放线菌酮药物处理,结果显示,随着药物对病毒蛋白合成的抑制,β-干扰素(IFN-β)的生成增多;通过构建不同的病毒蛋白真核表达质粒,转染至HEK293T细胞,经双荧光素酶报告基因系统筛选,发现病毒核衣壳(N)蛋白能抑制IFN-β启动子活性,且证明N蛋白通过干扰素调节因子3(IRF3)或IRF3上游信号分子调控IFN通路;免疫共沉淀分析进一步验证,确定线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)与PHEV N蛋白存在互作,为抑制IFN-β产生的潜在靶标.结果 表明,PHEV可通过其自身合成的N蛋白与宿主细胞MAVS相互作用,从而抑制IFN-β产生.本研究对于解析PHEV逃避宿主免疫应答机制具有重要参考意义.
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