【摘 要】
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目的:观察TGF-β1是否促进人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增殖并且探讨其作用机制.方法:用TGF-β1(0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 ng/ml)作用于体外培养的3～6代HTFs 24 h,CCK-8法、
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院眼科,江苏南京210029;南京医科大学第一附属医院心内科,江苏南京210029
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目的:观察TGF-β1是否促进人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增殖并且探讨其作用机制.方法:用TGF-β1(0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 ng/ml)作用于体外培养的3～6代HTFs 24 h,CCK-8法、EdU染色法检测其增殖;采用Western blot法检测HTFs中RhoE的表达及其下游细胞增殖相关蛋白cyclinD1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,用慢病毒建立RhoE敲降细胞系.结果:TGF-β1可以剂量依赖性促进HTFs增殖,以5 ng/ml TGF-β1处理后有统计学差异,EdU掺入法检测发现,5 ng/ml TGF-β1组EdU标记率明显高于对照组.5 ng/ml TGF-β1组HTFs中RhoE蛋白的表达平均灰度值明显低于对照组,细胞增殖相关蛋白cyclinD1、PCNA的表达平均灰度值高于对照组.细胞中RhoE沉默后,CCK-8法检测细胞活力较对照组上升,流式细胞术发现S期也升高,cyclinD1、PCNA灰度值也上升.结论:TGF-β1可以通过降低RhoE引起下游周期蛋白cyclinD1的表达升高,诱导人Tenon囊成纤维细胞增殖.
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