【摘 要】
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以东北七鳃鳗心肌总RNA反转录得到的cDNA为模板,PCR扩增PHB2基因全长CDS区,并将其定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建真核重组载体pEGFP-N1-Lm-PHB2.提取重组质粒,去除内
【机 构】
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辽宁师范大学生命科学学院,辽宁师范大学七鳃鳗研究中心
【基金项目】
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高等学校博士学科点专项科研基金项目（20102136120002）, 大连市科学技术基金项目（2010J21DW018）
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以东北七鳃鳗心肌总RNA反转录得到的cDNA为模板,PCR扩增PHB2基因全长CDS区,并将其定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建真核重组载体pEGFP-N1-Lm-PHB2.提取重组质粒,去除内毒素,利用脂质体介导的方法转染CHL、HeLa和MCF-7细胞,通过Western Blot检测转染后Lm-PHB2是否表达,Confocal观察EGFP融合蛋白在细胞中的表达及亚细胞定位.结果表明：PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切和测序证明真核表达载体构建成功;Western Blot检测到Lm-
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