人AWP1重组腺病毒的构建及其在人血管内皮细胞中的表达和定位

来源 :中国普外基础与临床杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gusterlyb
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目的构建人flag-AWP1(associated with protein kinase C related kinase1)基因的重组腺病毒载体作为AWP1的转基因工具,研究AWP1在人血管内皮细胞ECV304中的表达与定位。方法将flag-AWP1基因亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,经酶切鉴定正确后PmeⅠ线性化,转化至带有骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183中进行重组;经PacⅠ酶切鉴定和PCR鉴定、线性化后,用Lipofectamine转染293细胞进行包装、反复感染
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