【摘 要】
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目的 研究腺病毒介导的KDR启动子驱动CD/TK双自杀基因系统(AdKDR-CDglyTK)对肝癌细胞选择性杀伤作用.方法 将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达K
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目的 研究腺病毒介导的KDR启动子驱动CD/TK双自杀基因系统(AdKDR-CDglyTK)对肝癌细胞选择性杀伤作用.方法 将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的BEL-7402细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药5-FC和/或GCV,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应.结果 所得病毒滴度为2.5×1012 pfu/ml.两种细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加.RT-PCR方法检测发现:感染AdKDR-CDglyTK的BEL-7402有目的基因CDglyTK的表达,感染AdKDR-CDglyTK的LS174T细胞无目的基因表达.表达KDR的BEL-7402细胞对前药具有较高的敏感性,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(F=750.03,P＜0.001).融合基因的疗效优于任一单自杀基因(F=275.89,P＜0.05).将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应.结论 KDR基因启动子可调控双自杀基因系统选择性杀伤表达KDR的肝癌细胞.
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