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甜蜜素在食品添加剂中属于甜味剂，其化学名称为环己基氨基磺酸纳，其甜度是蔗糖的30～40倍，过量摄人会对人体的肝脏和神经系统造成危害。我国GB2760-2011《食品添加剂使用卫生标准》中规定，甜蜜素在一些常用食品（如水果罐头、腌制蔬菜、复合调味料、蜜饯、糕点、面包等）中可以使用，在配制酒中的最大使用量为0.65g/kg，而在葡萄酒、黄酒、果酒等发酵酒中是禁止添加甜蜜素的。在已发表的有关酒中甜蜜素的检测方法中，大多数关注的是白酒和葡萄酒中甜蜜素的检测。目前采用液相色谱质谱联用的方法对黄酒中甜蜜素的检测尚无研究，本文对此进行了研究摸索。
1 实验部分
（1）试剂与仪器
仪器：液相色谱串联质谱仪（美国Agilent公司）；天平。试剂：甜蜜素标准物质（纯度为99.3%）由中国计量科学研究院提供；甲醇、乙酸为色谱纯；实验用水为超纯水（蒸馏水经过超纯水系统制备）。
（2）色谱条件
色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18（4.6mm×100mm，3.5μm）；柱温：室温；流动相：60%甲醇（含0.1%乙酸）；流速：0.3mL/min。
（3）质谱条件
电离方式：电喷雾电离（ESI）、负离子模式；雾化气压力：35psi；干燥气：氮气；流速：12L/min；温度：350℃；采集方式：多反应监测（MRM）。
（4）标准溶液的配制
准确称取0.02g的甜蜜素标准物质，用蒸馏水溶解定容至100.0mL，得到浓度为200mg/L的标准贮备液。准确移取0.5mL标准贮备液用蒸馏水稀释定容至10.0mL，配制成浓度为10mg/L的标准使用液，再逐级稀释得到浓度在（20～2000）μg/L之间的系列标准工作溶液。
（5）样品测定
将样品用水稀释定容后，经0.45um滤膜过滤，备用。取处理后的样液和系列标准工作溶液各5μl分别注入液相色谱串联质谱仪中测定，以选择离子峰峰面积外标法定量。
2 结果与讨论
（1）色谱条件的优化
本研究采用Agilent Eclipse Plus C18（4.6mm×100mm，3.5μm）色谱柱进行分离，待测物在6min内出峰。还分别考察了60%甲醇（含0.1%乙酸）和60%乙腈（含0.1%乙酸）两种体系的流动相。结果表明，采用60%甲醇（含0.1%乙酸）作为流动相时，对甜蜜素有更好的峰形和分析灵敏度。
（2）质谱条件的优化
将甜蜜素标准物质稀释成1mg/L的标准溶液，通过直接进样法，利用全扫描模式、选择离子监测、子离子扫描进行质谱条件优化，使母离子与特征碎片离子强度达到最大。得到甜蜜素的母离子m/z178、子离子m/z79.7、最佳碎裂电压380V、最佳碰撞能量20eV。
（3）线性范围和检出限
将甜蜜素稀释成系列标准工作溶液，使浓度分别为20、100、500、2000g/L，进样5l，测定峰面积。以峰面积对浓度进行线性回归，得到标准物质的线性方程为y=1061.899327x+2201.570616和相关系数r=0.99994；以噪音响应的3倍来计算甜蜜素的检出限为0.02mg/L，说明此方法令人满意。
（4）方法回收率和精密度
取空白黄酒样品，进行2个水平加标实验，加标浓度为100、500g/L，重复测定3次，计算回收率和精密度结果见表1。表明该方法稳定性强、重现性好，能满足黄酒中甜蜜素检测的要求。
表1 甜蜜素的平均回收率、精密度测定结果
3 结论
本工作建立了液相色谱串联质谱法检测黄酒中甜蜜素的检测方法。该方法步骤简单、回收率高、精密度良好，为检测黄酒中的甜蜜素提供了科学的检测方法，为政府执法部门开展风险监控工作提供了有力的技术支持。
1 实验部分
（1）试剂与仪器
仪器：液相色谱串联质谱仪（美国Agilent公司）；天平。试剂：甜蜜素标准物质（纯度为99.3%）由中国计量科学研究院提供；甲醇、乙酸为色谱纯；实验用水为超纯水（蒸馏水经过超纯水系统制备）。
（2）色谱条件
色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18（4.6mm×100mm，3.5μm）；柱温：室温；流动相：60%甲醇（含0.1%乙酸）；流速：0.3mL/min。
（3）质谱条件
电离方式：电喷雾电离（ESI）、负离子模式；雾化气压力：35psi；干燥气：氮气；流速：12L/min；温度：350℃；采集方式：多反应监测（MRM）。
（4）标准溶液的配制
准确称取0.02g的甜蜜素标准物质，用蒸馏水溶解定容至100.0mL，得到浓度为200mg/L的标准贮备液。准确移取0.5mL标准贮备液用蒸馏水稀释定容至10.0mL，配制成浓度为10mg/L的标准使用液，再逐级稀释得到浓度在（20～2000）μg/L之间的系列标准工作溶液。
（5）样品测定
将样品用水稀释定容后，经0.45um滤膜过滤，备用。取处理后的样液和系列标准工作溶液各5μl分别注入液相色谱串联质谱仪中测定，以选择离子峰峰面积外标法定量。
2 结果与讨论
（1）色谱条件的优化
本研究采用Agilent Eclipse Plus C18（4.6mm×100mm，3.5μm）色谱柱进行分离，待测物在6min内出峰。还分别考察了60%甲醇（含0.1%乙酸）和60%乙腈（含0.1%乙酸）两种体系的流动相。结果表明，采用60%甲醇（含0.1%乙酸）作为流动相时，对甜蜜素有更好的峰形和分析灵敏度。
（2）质谱条件的优化
将甜蜜素标准物质稀释成1mg/L的标准溶液，通过直接进样法，利用全扫描模式、选择离子监测、子离子扫描进行质谱条件优化，使母离子与特征碎片离子强度达到最大。得到甜蜜素的母离子m/z178、子离子m/z79.7、最佳碎裂电压380V、最佳碰撞能量20eV。
（3）线性范围和检出限
将甜蜜素稀释成系列标准工作溶液，使浓度分别为20、100、500、2000g/L，进样5l，测定峰面积。以峰面积对浓度进行线性回归，得到标准物质的线性方程为y=1061.899327x+2201.570616和相关系数r=0.99994；以噪音响应的3倍来计算甜蜜素的检出限为0.02mg/L，说明此方法令人满意。
（4）方法回收率和精密度
取空白黄酒样品，进行2个水平加标实验，加标浓度为100、500g/L，重复测定3次，计算回收率和精密度结果见表1。表明该方法稳定性强、重现性好，能满足黄酒中甜蜜素检测的要求。
表1 甜蜜素的平均回收率、精密度测定结果
3 结论
本工作建立了液相色谱串联质谱法检测黄酒中甜蜜素的检测方法。该方法步骤简单、回收率高、精密度良好，为检测黄酒中的甜蜜素提供了科学的检测方法，为政府执法部门开展风险监控工作提供了有力的技术支持。