论文部分内容阅读
目的：构建真核表达重组体PcDNA3．1-BEGγ的稳定转染细胞株，为进一步深入研究REGγ的功能奠定基础。方法：提取MCF-γ细胞的总RNA为模板，通过RT—PCR获取全长REGγcDNA，经限制性内切酶EcoRI、EcoRV酶切后与PcDNA3．1连接构建重组体，再经内切酶酶切及DNA序列分析鉴定重组体构建正确。以Lipokctamine2000将重组体导入HBL-100细胞，由G418筛选出稳定转染细胞株。结果：经免疫细胞化学和RT—PCR检测并证实稳定转染细胞株中有REG1的高表达。结论：真核表达