论文部分内容阅读
目的:构建真核表达重组体PcDNA3.1-BEGγ的稳定转染细胞株,为进一步深入研究REGγ的功能奠定基础。方法:提取MCF-γ细胞的总RNA为模板,通过RT—PCR获取全长REGγcDNA,经限制性内切酶EcoRI、EcoRV酶切后与PcDNA3.1连接构建重组体,再经内切酶酶切及DNA序列分析鉴定重组体构建正确。以Lipokctamine2000将重组体导入HBL-100细胞,由G418筛选出稳定转染细胞株。结果:经免疫细胞化学和RT—PCR检测并证实稳定转染细胞株中有REG1的高表达。结论:真核表达