【摘 要】
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为构建人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库,从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞(PBL)中提取细胞总RNA,经逆转录后用套式PCR分别扩增抗体轻链Vκ和重链VH基因.先构建Vκ基因库,并使连接Vκ
【机 构】
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第四军医大学西京医院,第四军医大学微生物教研室
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为构建人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库,从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞(PBL)中提取细胞总RNA,经逆转录后用套式PCR分别扩增抗体轻链Vκ和重链VH基因.先构建Vκ基因库,并使连接Vκ和VH基因的linker与Vκ基因连接,再将VH基因克隆入Vκ基因库,即构建成功单链抗体(ScFv)库.随机挑取菌落鉴定,测序表明从PBL中扩增出人源性Vκ和VH基因,并构建了库容量约为2×106 的ScFv噬菌体抗体库.随机挑取克隆的测序表明,测定的VH基因与Kabat的抗体基因库中人抗体VH基因有较高的同源性,证明
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