【摘 要】
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构建血管生成抑制因子arresten基因的原核表达重组体,并进行初步表达.从人胎盘组织中提取总RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出arresten基因;采用T-A克隆法,将arrest
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科,洛阳东方医院普外科,华美生物工程公司洛阳生研中心
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构建血管生成抑制因子arresten基因的原核表达重组体,并进行初步表达.从人胎盘组织中提取总RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出arresten基因;采用T-A克隆法,将arresten基因克隆入pGEM-T载体中,经DNA测序确认后,构建原核表达重组体pRSET-Arr,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达.所获得的arresten基因经测序正确,并表达重组蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子量为26ku.构建的原核表达重组体pRSET-Arr能高效表达重组arresten蛋白.
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