【摘 要】
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目的 研究乙酰半胱氨酸（acetylcysteine, NAC）调控磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol-3-kinase, PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B, AKT）信号通路对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导肺泡上皮细胞活力、增殖、迁移及炎症因子的影响。方法 体外培养人肺泡上皮A549细胞，采用10μg/mL LPS诱导
【基金项目】
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陕西省2022年重点研发计划（2022SF-504）；
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目的 研究乙酰半胱氨酸（acetylcysteine, NAC）调控磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol-3-kinase, PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B, AKT）信号通路对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导肺泡上皮细胞活力、增殖、迁移及炎症因子的影响。方法 体外培养人肺泡上皮A549细胞，采用10μg/mL LPS诱导A549细胞建立炎症细胞模型作为LPS组，之后在模型基础上加入0.5、1、2、4、8 mmol/L NAC，以不做干预的细胞作为对照组，药物干预24 h，细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法筛选出最佳的NAC浓度用于后续实验研究。而后将细胞分为对照组、LPS组、NAC组（10μg/mL LPS+8 mmol/L NAC）、激活剂组（10μg/mL LPS+10μmol/L PI3K/AKT信号通路激活剂SC79）、NAC+激活剂组（10μg/mL LPS+8 mmol/L NAC+10μmol/L SC79）及NAC+抑制剂组（10μg/mL LPS+8 mmol/L NAC+10μmol/L PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002）。药物干预24 h后，CCK-8法、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2’-deoxyuridine, EdU）、划痕法和酶联免疫检测（ELISA）法分别测定细胞活力、增殖率、迁移率及炎症因子（IL-6、IL-8、IL-1β、IL-10）水平，蛋白免疫印迹法测定细胞中PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT水平。结果 干预细胞活力的最佳浓度为8 mmol/L NAC。与对照组比较，LPS组细胞活力、增殖率、抑炎因子IL-10水平及p-PI3K、p-AKT水平降低，迁移率和促炎因子（IL-6、IL-8、IL-1β）水平升高；与LPS组比较，NAC组和激活剂组细胞活力、增殖率、抑炎因子IL-10水平及p-PI3K、p-AKT水平升高，迁移率、促炎因子（IL-6、IL-8、IL-1β）水平降低；与NAC组比较，NAC+激活剂组上述指标变化进一步加大，而NAC+抑制剂组逆转上述指标变化。结论 NAC可通过激活PI3K/AKT信号通路抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞活力与增殖力降低、细胞迁移力增强及炎症反应。
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