【摘 要】
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目的 探究香叶木素(diosmetin,DM)对椎间盘退变的治疗作用及机制,为临床治疗椎间盘退变疾病提供理论依据和药物研发靶点.方法 通过CCK-8试剂盒检测DM对大鼠髓核细胞(nucleus
【机 构】
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271100,济南市人民医院疼痛科;250012济南,山东第一医科大学第一附属医院(山东省千佛山医院)疼痛科
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目的 探究香叶木素(diosmetin,DM)对椎间盘退变的治疗作用及机制,为临床治疗椎间盘退变疾病提供理论依据和药物研发靶点.方法 通过CCK-8试剂盒检测DM对大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)活力的影响,选取最适试验浓度;通过RT-PCR、Western blot检测各组髓核细胞中Caspase-3、COX-2、Ki67、MMPs表达变化以及NF-κB p65的活化水平;采用Hoechst 33258染色进一步检测各组细胞的凋亡情况,并通过免疫荧光技术检测各组细胞中NF-κB p65的核转位情况;最后使用yon Frey细丝检测IL-1β诱导的椎间盘退变大鼠模型的机械痛阈.结果 与IL-1β组相比,DM可从mRNA、蛋白水平显著下调IL-1β诱导的MMPs、COX-2的高表达(P＜0.05),并显著上调TIMP-1的表达(P＜0.05).与IL-1β组相比,DM显著抑制了IL-1β诱导的髓核细胞凋亡(P＜0.05),并显著下调了Caspase-3的表达(P＜0.05),显著上调Ki67的表达(P＜0.05).其次,与IL-1β组相比,DM显著降低了IL-1β诱导的NF-κB p65高度磷酸化以及入核量(P＜0.05).最后,与对照组相比,IL-1β诱导的椎间盘退变大鼠模型机械痛阈明显降低(P＜0.05);而与IL-1β组相比,DM显著降低了IL-1β诱导的动物模型的神经根疼痛(P＜0.05).结论 DM可以抑制IL-1β诱导的大鼠髓核细胞凋亡、炎症反应以及NF-κB p65核转位,具有缓解椎间盘退变引起的神经根性疼痛的作用.
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