分析替莫唑胺(TMZ)对胶质瘤U251细胞及其干细胞livin、MRP基因表达及细胞周期的影响。
方法分离培养U251细胞及其干细胞后，不同浓度的TMZ(0、25、50、100、200、400 μmol/L)干预72 h，CCK-8检测细胞增殖变化趋势，流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化，RT-PCR技术检测livin、MRP1、MRP3 mRNA表达。
结果本研究成功从U251细胞中分离出U251干细胞；与未干预组相比，25 μmol/L的TMZ干预U251细胞及其干细胞后其增殖率分别为0.952±0.011(t＝－8.219，P＝0.001)、0.937±0.029(t＝－3.822，P＝0.019)和100 μmol/L的TMZ干预U251细胞及其干细胞后其增殖率分别为0.750±0.018、0.887±0.039(t＝5.480，P＝0.005)；正常情况下，livin基因在U251细胞及其干细胞中的表达量分别为(0.411±0.025)×10－3、(0.571±0.040)×10－3(t＝－3.348，P＝0.004)，MRP1基因的表达量分别为(0.295±0.018)×－3、(0.481±0.034)×10－3(t＝－8.439，P＝0.001)，MRP3基因的表达量分别为(1.128±0.117) ×10－3、(0.963±0.059)×10－3(t＝2.176，P＝0.095)；200 μmol/L的TMZ干预U251细胞及其干细胞后livin mRNA表达量在分别为(0.020±0.002) ×10－3(t＝27.123，P＝0)、(0.066±0.007)×10－3(t＝21.345，P＝0)；200 μmol/L干预后MRP1 mRNA表达量为(0.556±0.041) ×10－3 (t＝－10.214，P＝0.001)、(0.609±0.044)×10－3(t＝－3.98，P＝0.016)；200 μmol/L干预MRP3 mRNA表达量为(1.397±0.192)×10－3(t＝－2.073，P＝0.107)、(1.496±0.302)×10－3(t＝－2.993，P＝0.040); 100 μmol/L干预后细胞周期U251细胞G2/M期百分比为11.353±0.516、39.1±1.2(t＝－37.1，P＝0)和U251干细胞S期百分比为21.1±1.0、30.2±1.7(t＝－8.07，P＝0.001)。
结论替莫唑胺能有效降低U251及其干细胞中livin基因的表达，并使细胞分裂周期停滞，降低细胞增殖率，促进细胞凋亡。MRP1和MRP3可能分别是原发胶质瘤与复发胶质瘤耐药的主要原因之一。