【摘 要】
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目的:探讨长链非编码RNA(long-chain noncoding,lncRNA)PCGEM1对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制.方法:收集2016年3月至2018年5月湖北医药学院附属太和医院胸
【机 构】
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湖北医药学院附属太和医院 病理科,湖北 十堰,442000荆州市中心医院 血液科,湖北 荆州,434020;
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目的:探讨长链非编码RNA(long-chain noncoding,lncRNA)PCGEM1对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制.方法:收集2016年3月至2018年5月湖北医药学院附属太和医院胸外科接受手术治疗的62例肺癌(lung cancer,LC)患者癌组织及相应的癌旁组织标本,并用以上组织构建LC组织芯片.用qPCR检测lncRNA PCGEM1及miR-148a在LC组织相应的癌旁组织及LC细胞株中的表达.构建lncRNA PCGEM1沉默细胞系A549-siPCGEM1和阴性对照A549-NC,并以A549细胞作为空白对照(Control组),用MTT和平板克隆实验检测敲减PCGEM1对A549细胞增殖能力的影响,Transwell和划痕实验检测敲减PCGEM1对A549细胞侵袭和迁移能力的影响.使用生物信息学网站StarBase预测可互补结合PCGEM1的miRNA,再根据Targetscan网站预测相应可靶向结合miRNA的基因;Western blotting实验检测TGF-β2/Smad2信号通路蛋白表达情况.结果:在LC组织中PCGEM1的表达水平高于癌旁组织而miR-148a的表达量明显低于癌旁组织(均P<0.05),PCGEM1在5种LC细胞株中的表达明显高于人肺成纤维细胞HLF-02(均P<0.05),且以A549细胞中表达最高.敲减PCGEM1后,与Control组和A549-NC组比较,A549-siPCGEM1组A549细胞增殖、侵袭和迁移能力显著降低(均P<0.05).StarBase和Targetscan网站预测结果显示,PCGEM1可与miR-148a互补结合,miR-148a与TGF-β2存在靶向结合位点.与Control组和A549-NC组比较,A549-siPCGEM1组中miR-148a表达明显升高,TGF-β2及p-Smad2蛋白的表达明显降低(均P<0.05).结论:lncRNA PCGEM1在LC组织和细胞株中高表达,高表达的PCGEM1可通过下调miR-148a水平强化TGFβ2/Smad2信号通路,从而促进A549细胞恶性生物学行为的进展.
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