【摘 要】
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目的针对人多瘤病毒KI株和WU株，建立一种快速、特异、灵敏的标准SOP，并初步应用于200例北京地区呼吸道感染儿童的NPA(Nasopharyngea Aspirates)的检测。方法设计巢式PCR和实时荧光定量PCR方法，检测KIPyV和WUPyV基因，并对扩增产物进行序列分析，比较其应用于儿童NPA的检测效果。结果KIPyV和WUPyV的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测灵敏性分别为10拷
【机 构】
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100052 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 卫生部医学病毒和病毒病重点实验室,100052 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 卫生部医学病毒和病毒病重点实验室,100052 北
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目的针对人多瘤病毒KI株和WU株，建立一种快速、特异、灵敏的标准SOP，并初步应用于200例北京地区呼吸道感染儿童的NPA(Nasopharyngea Aspirates)的检测。
方法设计巢式PCR和实时荧光定量PCR方法，检测KIPyV和WUPyV基因，并对扩增产物进行序列分析，比较其应用于儿童NPA的检测效果。
结果KIPyV和WUPyV的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测灵敏性分别为10拷贝/μl和1拷贝/μl，高于巢式PCR(500拷贝/μl)，两种检测方法中均无其他呼吸道病毒阳性扩增。TaqMan探针实时荧光定量PCR可重复性检测中KIPyV和WUPyV的CV值分别小于2.9%和1.95%。应用巢式PCR KIPyV和WUPyV阳性检出率为1.5%和8%，TaqMan探针实时荧光定量PCR检测检出率为12%、14%。
结论本研究建立了一种灵敏性、可重复性好、特异性高的快速核酸检测方法，其在临床上有较好的应用前景。
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