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[关键词] 免疫学检验;感染性疾病;甲肝乙肝;阳性率
[中图分类号] R512.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2021）25-0130-03
Clinical effect of immunological test in infectious diseases of hepatitis A and hepatitis B
XU Yan1 MA Xuefeng2 SUN Hui1
1.Department of Laboratory Medicine，Affiliated Hospital of Heze Medical College，Heze 274000，China;2.Medical Laboratory Teaching and Research Section，Heze Medical College，Heze 274000，China
[Abstract] Objective To analyze the clinical effect of the immunological test on infectious diseases of hepatitis A and hepatitis B. Methods A total of 105 patients were diagnosed and treated from August 2018 to September 2020，all of whom were suffering from the infectious diseases of hepatitis A and hepatitis B.With the random method as the standard，53 patients were counted in group A，and immunological tests were performed，that is，HBV surface antibody （anti-HBs） and HBV e antigen （anti-HBeAg） were tested by enzyme immunoassay，and then HBV-DNA was quantitatively detected.In group B，52 patients were counted，and anti-human immunoglobulin M （HAV-IgM） was tested by the traditional method. The positive rates of hepatitis A，hepatitis B and the HBsAg，HBsAb，HBeAg，HBeAb and HBcAb of hepatitis B were compared. Results A total of 21 patients of hepatitis A were detected in group A （39.62%），and 7 patients were detected in group B （13.46%），and the difference was statistically significant （χ2=9.186，P<0.05）. A total of 27 patients of hepatitis B were detected in group A （50.94%），and 13 patients were detected in group B （25.00%），and the difference was statistically significant （χ2=7.491，P<0.05）.The positive rates of five items of hepatitis B in group A were higher than those in group B，and the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion The immunological test for patients with hepatitis A and hepatitis B can effectively detect the diseases，and then guide the clinical treatment plan，with a high feasibility of testing.
[Key words] Immunological test; Infectious disease; Hepatitis A and hepatitis B; Positive rate
在經济推动下，环境污染等问题日益严重，导致感染类疾病的患病风险升高。甲型肝炎病毒（Heptaitis A Virus，HAV）与乙型肝炎病毒（HepatitisB virus，HBV）是极为常见的致病菌。前者呈球形，不含有包膜，直径约是27～31 nm，亚单位机构共32个，共包括20面，表现为对称性特征[1]。后者的环境抵抗性相对较强，在干燥或是热环境下仍可以存活，感染率较前者高。现阶段，乙肝已成为人类健康的重大威胁，且部分患者进展为慢性乙肝，导致不良预后。更有研究指出，甲肝乙肝是导致肝功能严重损伤，如肝硬化等疾病的主要原因，需要高度重视疾病的诊断与治疗工作。临床多通过抗免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）抗体检验方式检验以上病毒，但是其误诊率较高[2]。免疫学是新兴的自然科学，其根据免疫学理论进行免疫学相关实验，可以检出病毒标志物，进而提高疾病检出率。本研究选取2018年8月至2020年9月期间于本院诊治的感染性疾病甲肝乙肝患者105例，用于分析免疫学检验的临床效用。 1 资料与方法
1.1 一般资料
诊治于2018年8月至2020年9月间，共计感染性疾病甲肝乙肝患者105例。均对研究知情而且同意;符合临床检验指征;具备沟通能力;可独立完成本研究。排除免疫系统疾病;凝血功能异常;精神类疾病和恶性肿瘤患者。根据随机法分组，A组患者53例，男患与女患比值为30：23;年龄22～49岁，平均（32.52±2.44）岁;乙肝比甲肝为30：23。B组患者52例，男患与女患比值为28：24;年龄23～51岁，平均（32.89±2.34）岁;乙肝比甲肝为28：24。数据经假设检验差异无统计学意义（P>0.05）。
1.2方法
所选择仪器为郑州安图生物有限公司所产的安图全自动型酶标分析仪（S2010型），试剂盒为该公司所产的配套设备，同时选择配套试剂盒。B组选择传统法检验，固相抗体为抗人IgM抗体，置入预先收集的血清样本，加入特异抗原，捕获IgM抗体的非特异/特异性抗体。若捕获后的固相IgM抗体与特异抗原有效结合，则加入酶标抗原抗体，置入底物予以显色操作。
A组予以免疫学检验，借助酶免疫分析法进行测定，即通过双抗原夹心法检验乙肝病毒表面抗体（Hepatitis B virus surface antibodies，Anti-HBs），利用免疫学双抗体夹心法检测乙型肝炎病毒e抗原（Hepatitis B virus e antigen，HBeAg）。由于HBeAg是可溶性蛋白，因此机体确定HBV感染后，血液内含有乙肝病毒表面抗原（HBV surface antigen，HBsAg）以及HBeAg成分，此时利用双抗体夹心法可以准确检测HBeAg，再予以乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）定量检测。放射免疫竞争法测定乙型肝炎e抗体（Hepatitis B e antibody，Anti-Hbe），酶联免疫吸附法测定乙型肝炎核心抗体（hepatitis B core antibody，Anti-Hbc）。
1.3观察指标
观察甲肝与乙肝的阳性检出率。传统法检验中底物成功显色，则检出HAV-IgM抗体，则为阳性。免疫学检验中HBV-DNA定量检测可检出HBV，则为阳性[3]。记录乙肝五项（HBeAg、Anti-HBs、HBsAg、Anti-HBe和Anti-HBc）的阳性检出率。
1.4 统计学分析
采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验;计数资料用[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1对比两组甲肝与乙肝的阳性率
A组经免疫学检验后，甲肝阳性例数21，阴性例数32，阳性率为39.62%;乙肝阳性例数27，阴性例数26，阳性率为50.94%。B组经传统法检验后，甲肝阳性例数7，阴性例数45，阳性率为13.46%;乙肝阳性例数13，阴性例数39，阳性率为25.00%，可见，免疫学检验对于甲肝的阳性诊断率约为传统法检验的3倍，而免疫学检验对于乙肝的阳性诊断率约为传统法检验的2倍，对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
2.2 对比两组的乙肝五项阳性率
A组的乙肝五项阳性率均高于B组，对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。
3 讨论
甲肝的致病菌是HAV，其发病突然且迁延不愈，传播途径为粪便和经口传播。HAV被认为是最常见的嗜肝RNA病毒，其具有极强的耐酸碱性，且能够有效抵抗外界环境，在正常室温下可以存活一周，而且在25℃左右的干燥粪便中能存活1个月之久[4]。乙肝的致病菌是HBV，其发病较慢同样迁延难愈，其容易传染，症状主要为腹胀、肝区痛和恶心等，甚至会伴有蜘蛛痣、脾大和肝掌等表现。经电镜检查可见HBV呈现为大/小球形或是管形。若呈现大球形，则病毒十分完整，而小球形和管形多为空心包膜。其传播途径有性传播、血制品、血液以及皮肤传播。传统法检验可以检出肝炎标志物，但是受检验环境和操作等影响，可能会出现假阳性情况，因此具有局限性[6]。免疫学检验的原理是抗体反应和免疫学原理，其检出率更高，且误诊和漏诊情况更少。免疫学通过特异性、敏感标记与超微量等方法对生理亦或是病理免疫学指标进行测定[7]。其作为独立学科深入发展至细胞生物学与基因学领域，且能够高效结合于免疫学实验技术，积极运用在甲肝乙肝的疾病检验工作中。甲肝主要是通过不活法[K1]测定机体内的IgM抗体，而乙肝需要对Anti-HBs和抗HBeAg进行检测，若检出以上标志物则为阳性[8]。研究中采用双抗体夹心法进行检验，其能够将血清标本使酶标抗体或是固相载体表面抗体进行有效连接，待检的抗原表面同时存在两个抗原决定基，二者会发生结合反应，生成固相抗体、抗原与酶标抗体间的复合物质。在该反应系统内，酶标抗体以及固相抗体的实际含量必定多于待检抗原，所以复合物质的实际生成量和待检抗原的具体含量之间具有正相关性[9]。复合物质内部的酶在加入适量底物后会产生有色物质，可以根据这一物质确定待检抗原的具体含量。研究中借助抗原抗体反应进行病毒检验，其原理为：抗原以及抗体会发生特异性的结合反应，原因是抗体超变区所存在的分子以及抗原表位分子之间具有较高的亲和性，且互补性明显，因为二者的分子空间构型存有差异所以会结合于超变区沟槽的所含分子[10-11]。由于HAV是颗粒性抗原，因此与抗体结合后会生成凝集反应，而HBV是可溶性抗原，所以与抗体结合后会生成沉淀反应。根据以上反应类型可以检出相关标志物，从而提升阳性率[12-14]。
A组检出甲肝21例，比率为39.62%，B组检出甲肝7例，比率为13.46%;A组检出乙肝27例，比率为50.94%，B组检出乙肝13例，比率为25.00%，对比以上数据差异均有统计学意义（P<0.05）。结果与周茂锋[15]等研究发现对照组的甲肝检出9例，占比13.04%，乙肝检出17例，占比24.64%;观察组的甲肝检出31例，占比38.27%，乙肝检出41例，占比50.62%（P<0.05）基本一致。说明本研究的信度较高，能够有效指导临床诊断工作，且为治疗方案提供数据支撑。免疫学检验可以高效鉴别甲肝以及乙肝的病毒感染情况。收集甲肝患者的大便标本以后进行滤液处理，发现HAV抗原是病毒样颗粒，这是诊断甲肝的敏感性指标。免疫学检验的理论性基础是临床免疫学，其根据抗体会与抗原产生反应的免疫学原理，借助胶体金、荧光素或是酶等示踪和敏感标记等技术进行检验[16-18]。其能够特异性的检出机体内的病理性免疫学指标，较传统法相比，其检出率更高。A组的HBeAg阳性率（77.78%）、Anti-HBs阳性率（92.59%）、HBsAg阳性率（81.48%）、Anti-HBe阳性率（85.19%）、Anti-HBc（74.07%）均高于B组（P<0.05）。在急性乙肝病毒感染者的血清中存有大量的HBeAg、HBsAg与抗HBc，当血清中的HBeAg基本消失后便会出现Anti-HBe与Anti-HBc，其中HBeAg阳性为病毒复制相关指标。在乙肝五项指标中，大三阳（Anti-HBc阳性、HBsAg阳性和HBe阳性）的病毒复制能力和传染性最强，因此在免疫学检验中，大三阳的阳性率最高。乙肝病毒感染后，血清中最早出现的指标为Anti-HBc，其被认为是乙肝病毒的最常用标志性抗体，且是唯一可测出早期感染的标志物。数据显示小三阳（HBsAg、Anti-HBc和Anti-HBe）在乙肝病毒中的复制能力較差，传染性也弱，可以作为病毒感染的恢复性指标。免疫学检验乙肝五项的方法多样，严格根据试剂盒说明书进行操作，误差率极小，因此诊断精准度更高。 總之，免疫学检验可以作为甲肝、乙肝的首选检验技术，其可以提升检出率，进而尽早制定相关疗法，尽快缓解病情，改善预后，具有极高的可行性。
[参考文献]
[1] 余大莲，王敏，赵蕾，等.艾滋病合并乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与血清免疫学指标的关系[J].临床和实验医学杂志，2018（20）：2186-2189.
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[3] Pontus Karling，David Lundgren，Vincy Ekl？觟f，et al.Improved monitoring of inflammatory activity in patients with ulcerative colitis by combination of faecal tests for haemoglobin and calprotectin[J].Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation，2019，79（5）：341-346.
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（收稿日期：2020-11-27）
[中图分类号] R512.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2021）25-0130-03
Clinical effect of immunological test in infectious diseases of hepatitis A and hepatitis B
XU Yan1 MA Xuefeng2 SUN Hui1
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[Abstract] Objective To analyze the clinical effect of the immunological test on infectious diseases of hepatitis A and hepatitis B. Methods A total of 105 patients were diagnosed and treated from August 2018 to September 2020，all of whom were suffering from the infectious diseases of hepatitis A and hepatitis B.With the random method as the standard，53 patients were counted in group A，and immunological tests were performed，that is，HBV surface antibody （anti-HBs） and HBV e antigen （anti-HBeAg） were tested by enzyme immunoassay，and then HBV-DNA was quantitatively detected.In group B，52 patients were counted，and anti-human immunoglobulin M （HAV-IgM） was tested by the traditional method. The positive rates of hepatitis A，hepatitis B and the HBsAg，HBsAb，HBeAg，HBeAb and HBcAb of hepatitis B were compared. Results A total of 21 patients of hepatitis A were detected in group A （39.62%），and 7 patients were detected in group B （13.46%），and the difference was statistically significant （χ2=9.186，P<0.05）. A total of 27 patients of hepatitis B were detected in group A （50.94%），and 13 patients were detected in group B （25.00%），and the difference was statistically significant （χ2=7.491，P<0.05）.The positive rates of five items of hepatitis B in group A were higher than those in group B，and the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion The immunological test for patients with hepatitis A and hepatitis B can effectively detect the diseases，and then guide the clinical treatment plan，with a high feasibility of testing.
[Key words] Immunological test; Infectious disease; Hepatitis A and hepatitis B; Positive rate
在經济推动下，环境污染等问题日益严重，导致感染类疾病的患病风险升高。甲型肝炎病毒（Heptaitis A Virus，HAV）与乙型肝炎病毒（HepatitisB virus，HBV）是极为常见的致病菌。前者呈球形，不含有包膜，直径约是27～31 nm，亚单位机构共32个，共包括20面，表现为对称性特征[1]。后者的环境抵抗性相对较强，在干燥或是热环境下仍可以存活，感染率较前者高。现阶段，乙肝已成为人类健康的重大威胁，且部分患者进展为慢性乙肝，导致不良预后。更有研究指出，甲肝乙肝是导致肝功能严重损伤，如肝硬化等疾病的主要原因，需要高度重视疾病的诊断与治疗工作。临床多通过抗免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）抗体检验方式检验以上病毒，但是其误诊率较高[2]。免疫学是新兴的自然科学，其根据免疫学理论进行免疫学相关实验，可以检出病毒标志物，进而提高疾病检出率。本研究选取2018年8月至2020年9月期间于本院诊治的感染性疾病甲肝乙肝患者105例，用于分析免疫学检验的临床效用。 1 资料与方法
1.1 一般资料
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1.2方法
所选择仪器为郑州安图生物有限公司所产的安图全自动型酶标分析仪（S2010型），试剂盒为该公司所产的配套设备，同时选择配套试剂盒。B组选择传统法检验，固相抗体为抗人IgM抗体，置入预先收集的血清样本，加入特异抗原，捕获IgM抗体的非特异/特异性抗体。若捕获后的固相IgM抗体与特异抗原有效结合，则加入酶标抗原抗体，置入底物予以显色操作。
A组予以免疫学检验，借助酶免疫分析法进行测定，即通过双抗原夹心法检验乙肝病毒表面抗体（Hepatitis B virus surface antibodies，Anti-HBs），利用免疫学双抗体夹心法检测乙型肝炎病毒e抗原（Hepatitis B virus e antigen，HBeAg）。由于HBeAg是可溶性蛋白，因此机体确定HBV感染后，血液内含有乙肝病毒表面抗原（HBV surface antigen，HBsAg）以及HBeAg成分，此时利用双抗体夹心法可以准确检测HBeAg，再予以乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）定量检测。放射免疫竞争法测定乙型肝炎e抗体（Hepatitis B e antibody，Anti-Hbe），酶联免疫吸附法测定乙型肝炎核心抗体（hepatitis B core antibody，Anti-Hbc）。
1.3观察指标
观察甲肝与乙肝的阳性检出率。传统法检验中底物成功显色，则检出HAV-IgM抗体，则为阳性。免疫学检验中HBV-DNA定量检测可检出HBV，则为阳性[3]。记录乙肝五项（HBeAg、Anti-HBs、HBsAg、Anti-HBe和Anti-HBc）的阳性检出率。
1.4 统计学分析
采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验;计数资料用[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1对比两组甲肝与乙肝的阳性率
A组经免疫学检验后，甲肝阳性例数21，阴性例数32，阳性率为39.62%;乙肝阳性例数27，阴性例数26，阳性率为50.94%。B组经传统法检验后，甲肝阳性例数7，阴性例数45，阳性率为13.46%;乙肝阳性例数13，阴性例数39，阳性率为25.00%，可见，免疫学检验对于甲肝的阳性诊断率约为传统法检验的3倍，而免疫学检验对于乙肝的阳性诊断率约为传统法检验的2倍，对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
2.2 对比两组的乙肝五项阳性率
A组的乙肝五项阳性率均高于B组，对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。
3 讨论
甲肝的致病菌是HAV，其发病突然且迁延不愈，传播途径为粪便和经口传播。HAV被认为是最常见的嗜肝RNA病毒，其具有极强的耐酸碱性，且能够有效抵抗外界环境，在正常室温下可以存活一周，而且在25℃左右的干燥粪便中能存活1个月之久[4]。乙肝的致病菌是HBV，其发病较慢同样迁延难愈，其容易传染，症状主要为腹胀、肝区痛和恶心等，甚至会伴有蜘蛛痣、脾大和肝掌等表现。经电镜检查可见HBV呈现为大/小球形或是管形。若呈现大球形，则病毒十分完整，而小球形和管形多为空心包膜。其传播途径有性传播、血制品、血液以及皮肤传播。传统法检验可以检出肝炎标志物，但是受检验环境和操作等影响，可能会出现假阳性情况，因此具有局限性[6]。免疫学检验的原理是抗体反应和免疫学原理，其检出率更高，且误诊和漏诊情况更少。免疫学通过特异性、敏感标记与超微量等方法对生理亦或是病理免疫学指标进行测定[7]。其作为独立学科深入发展至细胞生物学与基因学领域，且能够高效结合于免疫学实验技术，积极运用在甲肝乙肝的疾病检验工作中。甲肝主要是通过不活法[K1]测定机体内的IgM抗体，而乙肝需要对Anti-HBs和抗HBeAg进行检测，若检出以上标志物则为阳性[8]。研究中采用双抗体夹心法进行检验，其能够将血清标本使酶标抗体或是固相载体表面抗体进行有效连接，待检的抗原表面同时存在两个抗原决定基，二者会发生结合反应，生成固相抗体、抗原与酶标抗体间的复合物质。在该反应系统内，酶标抗体以及固相抗体的实际含量必定多于待检抗原，所以复合物质的实际生成量和待检抗原的具体含量之间具有正相关性[9]。复合物质内部的酶在加入适量底物后会产生有色物质，可以根据这一物质确定待检抗原的具体含量。研究中借助抗原抗体反应进行病毒检验，其原理为：抗原以及抗体会发生特异性的结合反应，原因是抗体超变区所存在的分子以及抗原表位分子之间具有较高的亲和性，且互补性明显，因为二者的分子空间构型存有差异所以会结合于超变区沟槽的所含分子[10-11]。由于HAV是颗粒性抗原，因此与抗体结合后会生成凝集反应，而HBV是可溶性抗原，所以与抗体结合后会生成沉淀反应。根据以上反应类型可以检出相关标志物，从而提升阳性率[12-14]。
A组检出甲肝21例，比率为39.62%，B组检出甲肝7例，比率为13.46%;A组检出乙肝27例，比率为50.94%，B组检出乙肝13例，比率为25.00%，对比以上数据差异均有统计学意义（P<0.05）。结果与周茂锋[15]等研究发现对照组的甲肝检出9例，占比13.04%，乙肝检出17例，占比24.64%;观察组的甲肝检出31例，占比38.27%，乙肝检出41例，占比50.62%（P<0.05）基本一致。说明本研究的信度较高，能够有效指导临床诊断工作，且为治疗方案提供数据支撑。免疫学检验可以高效鉴别甲肝以及乙肝的病毒感染情况。收集甲肝患者的大便标本以后进行滤液处理，发现HAV抗原是病毒样颗粒，这是诊断甲肝的敏感性指标。免疫学检验的理论性基础是临床免疫学，其根据抗体会与抗原产生反应的免疫学原理，借助胶体金、荧光素或是酶等示踪和敏感标记等技术进行检验[16-18]。其能够特异性的检出机体内的病理性免疫学指标，较传统法相比，其检出率更高。A组的HBeAg阳性率（77.78%）、Anti-HBs阳性率（92.59%）、HBsAg阳性率（81.48%）、Anti-HBe阳性率（85.19%）、Anti-HBc（74.07%）均高于B组（P<0.05）。在急性乙肝病毒感染者的血清中存有大量的HBeAg、HBsAg与抗HBc，当血清中的HBeAg基本消失后便会出现Anti-HBe与Anti-HBc，其中HBeAg阳性为病毒复制相关指标。在乙肝五项指标中，大三阳（Anti-HBc阳性、HBsAg阳性和HBe阳性）的病毒复制能力和传染性最强，因此在免疫学检验中，大三阳的阳性率最高。乙肝病毒感染后，血清中最早出现的指标为Anti-HBc，其被认为是乙肝病毒的最常用标志性抗体，且是唯一可测出早期感染的标志物。数据显示小三阳（HBsAg、Anti-HBc和Anti-HBe）在乙肝病毒中的复制能力較差，传染性也弱，可以作为病毒感染的恢复性指标。免疫学检验乙肝五项的方法多样，严格根据试剂盒说明书进行操作，误差率极小，因此诊断精准度更高。 總之，免疫学检验可以作为甲肝、乙肝的首选检验技术，其可以提升检出率，进而尽早制定相关疗法，尽快缓解病情，改善预后，具有极高的可行性。
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（收稿日期：2020-11-27）