小鼠白介素-10真核表达载体的构建及表达

来源 :现代消化及介入诊疗 | 被引量 : 0次 | 上传用户：happyyoung

【摘要】

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目的构建小鼠白介素-10（murine interleukin-10,mIL-10）的真核表达载体,并研究其在293T细胞中的表达。方法 RT-PCR扩增小鼠脾脏IL-10基因后,克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,酶切

【作者】

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林英豪叶长虹熊婧毕丽红黎丽旋刘洋洋张春忙何继满

【机构】

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南方医科大学南方医院消化内科,南京市江宁医院血液净化中心

【出处】

：

现代消化及介入诊疗

【发表日期】

：

2013年3期

【关键词】

：

白介素-10 PCDNA3 293T细胞 Interleukin-10 pcDNA3.0 293T cell

【基金项目】

：

广东省科技计划项目（2009B060700055）, 广东省教育部产学研结合项目（2011B090400017）

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目的构建小鼠白介素-10（murine interleukin-10,mIL-10）的真核表达载体,并研究其在293T细胞中的表达。方法 RT-PCR扩增小鼠脾脏IL-10基因后,克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,酶切和测序鉴定重组质粒的大小、序列。采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.0-mIL-10瞬时转染293T细胞,用Westernblot法检测IL-10表达。结果重组质粒pcDNA3.0-mIL-10构建成功,而且转染了293T细胞中提取的蛋白可检测到活性蛋白。结论经酶切和测序鉴定重组质粒

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