【摘 要】
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为获得有效预防猪圆环病毒2型(PCV2)及伪狂犬病(PR)感染的重组活载体疫苗,利用同源重组将PCV2 YY株ORF2和细胞因子佐剂IL-2基因插入rPRV-gE-/TK-/EGFP+缺失的TK基因位点,获得
【机 构】
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河南农业大学动物医学院,河南郑州450002
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为获得有效预防猪圆环病毒2型(PCV2)及伪狂犬病(PR)感染的重组活载体疫苗,利用同源重组将PCV2 YY株ORF2和细胞因子佐剂IL-2基因插入rPRV-gE-/TK-/EGFP+缺失的TK基因位点,获得重组病毒rPRV-gE-/TK-/ORF2+/IL-2+.将重组病毒 rPRV-gE-/TK-/ORF2+/IL-2+及对照 rPRV-gE-/TK-/ORF2+、PCV 亚单位疫苗、PR活疫苗和DMEM培养液分别免疫小鼠,4周后加强免疫1次,利用PCV2间接ELISA试验、PRV血清中和试验、T淋巴细胞转化试验和细胞亚群及因子测定等评价重组病毒rPRV-gE-/TK-/ORF2+/IL-2+的免疫原性.结果显示,构建的rPRV-gE-/TK-/ORF2+/IL-2+可在BHK-21细胞内表达,免疫鼠产生抗PCV2和PRV的特异性中和抗体,能刺激CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的增殖及促使IFN-γ、IL-4和IL-12细胞因子的表达水平明显升高.结果表明,成功构建的rPRV-gE-/TK-/ORF2+/IL-2+能有效诱导机体产生较高水平的免疫效果,IL-2起到免疫增强作用,可作为预防猪PR和PCV感染相关疾病的候选疫苗株.
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