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目的:探索CRISPR/Cas9基因编辑技术在构建亨廷顿病(Huntington's Disease,HD)细胞模型中的应用。方法:借助CRISPR/Cas9靶点设计网站对IT15基因进行分析并设计gRNA靶点序列,检测gRNA靶点序列的体外Cas9酶切活性。选择体外活性较好的一对gRNA靶点序列并装载到VK001-05打靶质粒上,根据靶点位置设计并构建50个CAG(Poly Q)重复且有EGFP和PuroR标记的Donor质粒。将打靶质粒和Donor质粒混合并借助转染试剂转染CATH-a细胞,提取转染后