【摘 要】
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目的 探究类固醇受体共激活因子3(SRC-3)在膀胱癌中的作用.方法 使用RT-PCR及Western Blot实验检测膀胱癌组织中SRC-3的表达;构建SRC-3重组表达质粒/空载质粒、SRC-3 siRNA/siRNA control、CCK8实验、平板克隆形成实验、Transwell实验、流式细胞凋亡实验及Western blot实验分别检测SRC-3对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响;结合高通量测序结果及生物信息学网站对膀胱癌中SRC-3可能作用的下游靶基因进行预测,GST融合蛋白沉降实验(
【机 构】
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116021 大连市第五人民医院泌尿外科
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目的 探究类固醇受体共激活因子3(SRC-3)在膀胱癌中的作用.方法 使用RT-PCR及Western Blot实验检测膀胱癌组织中SRC-3的表达;构建SRC-3重组表达质粒/空载质粒、SRC-3 siRNA/siRNA control、CCK8实验、平板克隆形成实验、Transwell实验、流式细胞凋亡实验及Western blot实验分别检测SRC-3对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响;结合高通量测序结果及生物信息学网站对膀胱癌中SRC-3可能作用的下游靶基因进行预测,GST融合蛋白沉降实验(GST-pull down)进行靶基因结果检测和验证.结果 与癌旁正常组织比较,SRC-3 mRNA及蛋白在膀胱癌组织中呈明显高表达(P<0.05);过表达SRC-3后,膀胱癌细胞增殖、平板克隆形成能力、迁移、侵袭能力升高(P<0.05),细胞凋亡率及促凋亡蛋白表达明显降低(P<0.05),抑制SRC-3表达后,膀胱癌细胞增殖、平板克隆形成能力、迁移、侵袭能力则明显降低(P<0.05),细胞凋亡率及促凋亡蛋白表达则明显增高(P<0.05);GST-pull down实验结果显示,膀胱癌中SRC-3蛋白与CXCR4蛋白存在靶向结合关系.结论 SRC-3在膀胱癌中高表达,可通过靶向CXCR4表达促进膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭,影响肿瘤细胞凋亡,参与膀胱癌的发生、发展.
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