【摘 要】
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【目的】探究葛根素是否通过AMPK通路促进松辽黑猪前体脂肪细胞分化，以期为在饲粮中添加葛根素改善猪肉肉质提供参考。【方法】待松辽黑猪前体脂肪细胞汇合度达90%时进行为期4 d的诱导分化。诱导分化时，将细胞分为对照组（Con）、葛根素组（Pue）、葛根素+AMPK激活剂AICAR组（AICAR）及葛根素+AMPK抑制剂CompoundC组（CompoundC）,对照组诱导液中不添加葛根素，Pue组添
【机 构】
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吉林省农业科学院动物生物技术研究所
【基金项目】
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中央引导地方科技发展资金（202002066JC）； 吉林省农业科技创新工程（C12044104）；
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【目的】探究葛根素是否通过AMPK通路促进松辽黑猪前体脂肪细胞分化，以期为在饲粮中添加葛根素改善猪肉肉质提供参考。【方法】待松辽黑猪前体脂肪细胞汇合度达90%时进行为期4 d的诱导分化。诱导分化时，将细胞分为对照组（Con）、葛根素组（Pue）、葛根素+AMPK激活剂AICAR组（AICAR）及葛根素+AMPK抑制剂CompoundC组（CompoundC）,对照组诱导液中不添加葛根素，Pue组添加40μmol/L葛根素，AICAR组添加40μmol/L葛根素+500μmol/L AICAR,CompoundC组添加40μmol/L葛根素+20μmol/L CompoundC。诱导分化结束，收集各组细胞，用甘油三酯（TG）酶法检测细胞中甘油三酯浓度；实时荧光定量PCR检测AMPK各亚基以及成脂分化相关基因的表达水平；用Western blotting检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）、p-AMPK（Thr-172）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的蛋白表达水平；通过Autodock Vina 1.20对葛根素、AMPKα亚基做分子对接预测。【结果】甘油三酯测定结果显示，与Con组相比，Pue组甘油三酯浓度显著增加（P<0.05）;与Pue组相比，AICAR组甘油三酯浓度显著降低（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示，与Con组相比，Pue组PPKAG2、PPKAB1、PPKAB2、PPKAA1、PGC-1α表达量均显著降低（P<0.05）,Pue组C/EBPα、PPARγ、ACC表达量均显著增加（P<0.05）;与Pue组相比，AICAR组PPKAG1、PPKAG2、PPKAB1、PPKAB2、PPKAA1表达量显著增加（P<0.05）,AICAR组C/EBPα、PPARγ、ACC表达量均显著降低（P<0.05）,CompoundC组PPKAG1、PPKAG2、PPKAB2表达量均显著降低（P<0.05）,CompoundC组C/EBPα、ACC表达量均显著增加（P<0.05）。Western blotting结果显示，与Con组相比，Pue组PPARγ、ACC蛋白表达量显著增加（P<0.05）,AMPK、p-AMPK蛋白表达量显著下降（P<0.05）,且p-AMPK/AMPK显著下降（P<0.05）;与Pue组相比，AICAR组PPARγ、ACC蛋白表达量显著下降（P<0.05）,AMPK、p-AMPK蛋白表达量显著增加（P<0.05）,CompoundC组PPARγ、ACC蛋白表达量显著增加（P<0.05）,AMPK、p-AMPK蛋白表达量及p-AMPK/AMPK显著下降（P<0.05）。【结论】40μmol/L葛根素能够显著增加脂肪细胞中甘油三酯含量，显著上调成脂分化基因PPARγ、C/EBPα、ACC的表达量，显著下调AMPK各亚基的表达量，AMPK激活剂AIRCR可显著抑制葛根素的作用，说明葛根素可通过抑制AMPK通路调节松辽黑猪前体脂肪细胞成脂分化。
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