人源性长寿保障基因2对脂多糖诱导的PC12细胞损伤的影响

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyuanshan3
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目的 探讨沉默人源性长寿保障基因2(LASS2)基因对脂多糖(LPS)诱导的PC12细胞活力、凋亡及核转录因子kappaB(NF-kB)信号通路的影响.方法 将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞分为4 组:空白组(无任何处理)、LPS组(200 μg·mL-1 LPS处理PC12细胞)、LPS+NC组(转染阴性对照siRNA质粒后用200 μg·mL-1 LPS 处理)、LPS+si-LASS2 组(转染 LASS2 的特异性siRNA质粒后用200 μg·mL-1 LPS处理).以蛋白质印迹法检测LASS2、磷酸化NF-kB(p-NF-kB)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)和环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达.细胞检测试剂盒-8和流式细胞术分别检测细胞活力(OD值)与凋亡率.活性氧(ROS)试剂盒检测ROS含量(相对荧光强度).结果 空白组、LPS组、LPS+NC组、LPS+si-LASS2 组的LASS2蛋白相对表达量分别为0.11 ± 0.01,0.80 ± 0.07,0.79 ± 0.06 和0.16 ± 0.02;这4组的细胞活力分别为0.81 ± 0.06,0.40 ± 0.04,0.41 ± 0.04和0.68 ± 0.06;这4组的细胞凋亡率分别为(4.51 ± 0.46)%,(31.33 ± 1.75)%,(30.06 ± 1.61)%和(16.74 ± 1.01)%;这4 组的 ROS 水平分别为248.20 ± 15.30,521.80 ± 23.60,518.90 ± 22.30,396.60 ± 18.70;这 4 组的 COX-2 蛋白相对表达量分别为0.07 ± 0.01,0.66 ± 0.06,0.67 ± 0.06和0.17 ± 0.02;这4组的p-NF-kB蛋白相对表达量分别为0.10 ± 0.01,0.51 ± 0.05,0.53 ± 0.05和0.18 ± 0.02;这4组的Cleaved-caspase3 蛋白相对表达量分别为 0.02 ± 0.01,0.29 ± 0.03,0.28 ± 0.03和0.06 ± 0.01.上述指标:LPS组和LPS+NC组与空白组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);LPS+si-LASS2组与LPS组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 沉默LASS2表达可增强PC12细胞活力,抑制细胞凋亡,从而对神经损伤有保护作用,其机制可能与抑制 Cleaved-caspase3、p-NF-kB、COX-2表达和ROS水平有关.
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