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采用RNA干扰(RNAi)腺病毒感染法评价糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)在脂肪乳抑制布比卡因诱导大鼠心肌细胞凋亡中的作用。
方法H9C2大鼠心肌细胞复苏培养后，以1×105个/ml细胞密度接种于96孔板上，采用随机数字表法分为8组(n＝10)：空白对照组(C组)、布比卡因组(B组)、脂肪乳组(LE组)、布比卡因＋脂肪乳组(B＋LE组)、空白对照＋ GSK-3βRNAi腺病毒(GSK-3βi)组(C＋GSK-3βi组)、布比卡因＋GSK-3βi组(B＋GSK-3βi组)、脂肪乳＋GSK-3βi组(LE＋GSK-3βi组)、布比卡因＋脂肪乳＋GSK-3βi组(B＋LE＋GSK-3βi组)。B组、LE组、B＋LE组分别用终浓度为1 mmol/L布比卡因、1%脂肪乳、1 mmol/L布比卡因＋1%脂肪乳的培养基孵育。C＋GSK-3βi组、B＋GSK-3βi组、LE＋GSK-3βi组、B＋LE＋GSK-3βi组经GSK-3βi腺病毒感染后第2天给予以上药物孵育。药物孵育24 h后采用Western blot法检测Bax和Bcl-2的表达，采用DAPI法确定细胞凋亡率。
结果与C组比较，B组Bax表达上调，Bcl-2表达下调，细胞凋亡率升高(P<0.05)。与B组比较，B＋LE组Bax表达下调，Bcl-2表达上调，细胞凋亡率降低(P<0.05)。与B＋LE组比较，B＋LE＋GSK-3βi组Bax表达上调，Bcl-2表达下调，细胞凋亡率升高(P<0.05)。
结论脂肪乳抑制布比卡因诱导大鼠心肌细胞凋亡的机制与GSK-3β有关。