【摘 要】
：
目的 探讨支气管肺泡腔等细胞外液中是否存在泛素蛋白酶体及其在急性肺损伤过程中的变化和作用机制.方法 应用大鼠肺挫伤模型研究急性肺损伤支气管肺泡腔内泛素蛋白酶体含量变化及其可能的病理生理作用.分别采用生化检测、酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blot等方法研究对照组及急性肺损伤组伤后6～168 h支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白酶体20S亚基、泛素等含量及其活性.结果 急性肺损伤后
【机 构】
：
430060,武汉大学人民医院胸外科,430060,武汉大学人民医院胸外科,430060,武汉大学人民医院胸外科,430060,武汉大学人民医院胸外科,430060,武汉大学人民医院胸外科,Depar
论文部分内容阅读
目的 探讨支气管肺泡腔等细胞外液中是否存在泛素蛋白酶体及其在急性肺损伤过程中的变化和作用机制.方法 应用大鼠肺挫伤模型研究急性肺损伤支气管肺泡腔内泛素蛋白酶体含量变化及其可能的病理生理作用.分别采用生化检测、酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blot等方法研究对照组及急性肺损伤组伤后6～168 h支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白酶体20S亚基、泛素等含量及其活性.结果 急性肺损伤后其BALF中20S蛋白酶体、泛素含量明显增加,在24 h达到峰值(20S:(2397 ±71) μg/L;泛素(469±124) μg/L),168 h恢复至正常水平(20S:(42±30) μg/L;泛素(31±6) μg/L).BALF中ATP/ Mg2+依赖的多肽酶Epoxomicin敏感的胰凝乳蛋白酶样(CT-L)及Epoxomicin敏感的胰蛋白酶样(T-L)酶活性在肺挫伤后6～24 h明显增加,两者均在伤后24 h增高到峰值[CT-L:(3621±245) pmol/(h·ml);T-L:(736±91) pmol/(h·ml)].在急性肺损伤的BALF中加入ATP/ Mg2+可导致蛋白质降解明显增加,但加入Epoxomicin或乙二胺四乙酸(EDTA)可显著抑制蛋白质降解.结论 蛋白酶体存在于细胞外液;在急性肺损伤后,蛋白酶体释放进入细胞外支气管肺泡腔中,在肺泡蛋白质降解、廓清过程中起重要作用。
其他文献
本研究旨在观察缺氧诱导因子-1a（HIF—1a）、基质金属蛋白酶（MMP）-9、血管内皮生长因子（VEGF）在实验大鼠脑动脉瘤（CA）中表达及HIF-1a抑制剂强力霉素对大鼠CA形成的影响，
目的 探讨4种不同免疫抑制剂(他克莫司、环孢素A、雷帕霉素、雷公藤多甙)对Caco-2和HT-29细胞人β防御索1和2(hRD-1/2)的表达影响及机制.方法 通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测终质量浓度为10 μmol/L的4种不同免疫抑制剂对白细胞介素-1β(IL-1β,20μg/L)诱导的人肠上皮细胞hBD-1/2表达的影响,应用凝胶电泳迁移
微小RNA(miRNA)是一类长度为19 ～ 25个核苷酸的单链RNA,是由Dicer酶从折叠的70 ～ 100个核苷酸的发夹状转录前体RNAs(pre-microRNAs)上切割得到的小分子RNAs,主要通过与靶信使RNA(mRNA)的3’-非翻译区(3’-UTR)碱基配对的方式来执行对靶mRNA的切割或者翻译抑制功能,抑制靶基因表达而起调控作用[1].业已证实,正常组织与恶性肿瘤组织的rniR
近年来,乳腺癌的发病率明显升高[1],乳腺癌癌细胞的免疫应答调节机制备受重视.本研究旨在探讨CD4+CD25+ CD127dim/-调节性T细胞细胞在乳腺癌患者外周血中的表达及意义.一、材料与方法1.研究对象:采集遵义医学院附属医院甲状腺乳腺外科2011年7月至12月有完整病历资料病理确诊的30例女性乳腺肿瘤患者术前外周静脉血1 ml;同期两次另取2例乳癌女性患者外周静脉血10 ml.采集标本时所
目的 探讨肺癌细胞株及肺癌组织中神经丝蛋白轻链多肽(NEFL)的表达与肺癌患者临床病理特征和生存期之间的相关性.方法 链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组织化学法检测108例肺癌组织中NEFL的表达,并对108例肺癌患者进行随访观察.非参数秩和检验检测两个独立样本的NEFL的表达差异;Cox比例风险模型分析预后,应用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 NEFL的阳性表达率在淋巴结转
目的 探讨肺癌在细胞病理学样本组织学分类及分子学检测解决方案.方法 120例肺癌细胞学样本在常规涂片做出定性诊断并部分予以组织学分类后,结合细胞蜡块切片进行甲状腺转录因子-1(TTF-1)、p63、E-钙黏蛋白(E-cad)、细胞角蛋白(CK5/6)、上皮膜抗原(EMA)、突触素(Syn)、神经细胞黏附分子(CD56)、嗜铬素A(CgA)、视网膜钙蛋白(CR)等8项的免疫组织化学染色后再分类并对两
在肝脏外科中肝功能状态对肝切除术方案的选择和实施具有重要指导意义,所以术前对肝功能作精准评估甚为重要.但传统的静态生化检测以及以生化指标为基础的综合评分系统如Child-Pugh评分、MELD评分都不能够及时、准确反映肝脏的损害程度和储备功能情况,存在一定的局限性[1].而作为一种能动态评估肝储备功能的吲哚菁绿(ICG)排泄试验已被证实能够更加灵敏、准确和安全地定量评估肝切除术前肝脏储备功能.现介
目的 探讨缺氧诱导因子-2仅（HIF-2a）沉默对胃癌细胞株SGC7901凋亡的影响及其机制。方法常规培养SGC7901细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）和Westernblot法检测低氧组（90％氮气＋5％氢气＋5％二氧化碳）和正常氧条件下HIF-2a、B淋巴细膨白血病-2（bel-2）、bcl-2相关x蛋白（bax）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3的表达；合成针
组织缺氧是慢性下肢缺血性疾病发生发展的重要原因,其分子机制尚不清楚[1].本研究旨在观察ECV304细胞缺氧环境下缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的变化并探讨其意义.一、材料和方法1.细胞培养及活力分析:ECV304细胞缺氧处理采用混合气体(94％N2、5％CO2 、1％ O2)于RPMI 1640培养基中培养,噻唑蓝(MTT)比色法测定
我们以干细胞生长因子(HGF)和α-成纤维细胞生长因子(α-FGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)特定向肝细胞分化,为进一步通过干细胞移植治疗肝脏疾病提供依据.一、材料与方法1.大鼠BMSCs的分离和培养:通过动物实验伦理委员会的批准,4周龄SD大鼠被安置在浙江省东阳市人民医院的实验动物中心接收标准的饮食,健康SD大鼠麻醉处死后提取股骨和胫骨骨髓腔中的DMEM-LG冲洗液,细胞重悬液被转移