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摘要：探讨阴道脱落细胞学检查中标本采集，染色及细胞形态进行分析?通过阴道分泌物细胞学检查，对内分泌检查，通常用于月经失调?闭经等疾病的诊断与治疗参考，对于生殖道肿瘤的防癌普查及癌肿诊断，早期防治有着重要的意义?
关键词：阴道脱落细胞检查；标本采集；染色；细胞形态
【中图分类号】R711.73 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602（2015）05-0172-02
女性生殖道各器官所覆盖的上皮主要有两种?一是鳞状上皮，主要见于阴道?子宫颈外口等部位；二是柱状上皮，主要见于输卵管?子宫内腔?子宫颈管等部位?子宫颈外口鳞状上皮和柱状上皮交接处是子宫颈癌的好发部位?通过阴道分泌物细胞学检查，对于生殖道肿瘤的早期防治有着重要的意义?
1 一般资料
对2014年1月～12月收治的妇产科患者60例，年龄 22～43岁，平均29岁?均为已婚妇女做宫颈刮片进行阴道脱落细胞检查?
2 标本采集
2.1采集前准备工作 在清洁玻璃片上方刻好号码，在送检申请单上亦写好同一号码?准备好清洁刮板?刮板可取木制或竹制压舌板的一半，一端做成半月形?准备好玻璃吸管以采集后穹隆标本?准备固定液：常用固定液有以下三种：①固定液最好用等分量之95%乙醇与乙醚?乙醚容易挥发，瓶口必须塞紧?此固定液细胞染色最为清楚?②95%乙醇固定液，一般用于普查工作?固定时间不要超过30分钟，固定时间长可影响核的着色?③甲醇固定液?固定液每次用过，必须过滤后再用，以防止玻璃片上冲洗下来的细胞污染，一般固定10分钟以上即可染色?
2.2采取方法：不同的检查目的，可选择不同部位取材?一般采用生理盐水浸湿的棉拭子于阴道深部或宫颈管口?阴道穹隆后部等处取材?必须在标本干燥前尽快投入固定液内，以防细胞破坏，固定时间不得短于15分钟?最理想的制片方法是一个患者的涂片单独固定，以防止细胞标本相互污染[1]?经过巴氏染色?姬姆萨染色或革兰染色，进行肿瘤细胞筛选或病原微生物检查?
2.3临床经验
2.3.1采取标本前24小时内患者应无性交?盆浴或阴道冲洗?所用器械必须清洁?干燥，不黏附任何化学药品，如酒精?肥皂水等，亦不可使用任何润滑剂?
2.3.2取得的标本刮在玻片上时，应向一个方向涂抹，切忌往返，以免损坏细胞；涂片厚薄宜适中，过厚染色不良，并易脱落，过薄细胞稀少，影响诊断?
2.3.3如果盛固定液之器皿中没有分格或无固定架时，则需在每张玻片上卡一曲别针，以防两片相粘，损坏标本?
3 常用染色法
3.1简易快速癌细胞染色法 此法为上海市纺织工业局第二医院于1958年用于癌細胞检查，经改进更宜于配制和应用?
3.1.1染液配制 第一液：1液：盐基湖蓝1 g，溶于100 ml水内；2液：高锰酸钾（AR试剂二级）1 g，溶于100 ml水内?将1?2液分别装于三角烧瓶中煮沸，溶解后将2液倾入1液混合后再煮沸25分钟，趋热过滤即可?第二液：1%伊红乙醇（85%）溶液?
3.1.2染色步骤 涂片标本经干燥后用甲醇固定10分钟?标本于第一液内染3～4秒，水洗?放入第二液内3～4秒，水洗后，玻片反面揩干即可镜检?
3.2瑞氏-姬姆萨复合染色 瑞氏和姬姆萨两种染色原理基本相同，而染色又各有优缺点，因此在细胞学检查中常用两者复合染色，以取长补短，互相补充?染色结果，胞浆结果，胞浆及其中颗粒与核染色质均匀较满意?
3.2.1试剂 瑞氏-姬姆萨染液配制法：瑞氏粉 0.38 g，姬姆萨粉0.03 g；甲醇 100 ml?先将瑞氏粉与姬姆萨粉放在清洁?干燥的乳钵里，加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将已溶解的染料倒入棕色瓶中，未溶解的再加少量甲醇溶解，甲醇全部用完为止?配好的染色液48小时后可以使用，放置越久越好用[2]?pH 6.4～6.8磷酸盐缓冲液：磷酸二氢钾（KH2PO4） 0.3 g，磷酸氢二钠（Na2HPO4） 0.2 g，蒸馏水 加至1 000 ml，配好后用磷酸溶液校正pH，如无缓冲液也可用新鲜蒸馏水代替?
3.2.2染色步骤 涂片上滴加瑞氏-姬姆萨染色液适量?1分钟后加缓冲液适量?
4阴道脱落细胞检查细胞形态
4.1女性生殖道炎症的细胞形态 女性生殖道炎症是妇女的常见病?长期?慢性炎症刺激，又可诱发核异质甚至恶性肿瘤?识别炎症病变的细胞形态变化，对于诊断与癌症鉴别都有重要意义?
4.1.1慢性子宫颈炎 为妇女最为常见的疾病?临床表现为白带增多，宫颈糜烂或肥大或出现息肉?涂片背景“污浊”，粘液?白细胞?吞噬细胞及细胞碎片较多，上皮细胞可出现各种炎症变化，如核轻度增大?深染?胞质出现空泡?底层细胞增多，重度也可出现核异质?
4.1.2老年性阴道炎 见于绝经后的老年妇女?涂片中以萎缩型基底层细胞为主，细胞较小?大小不一，胞质变薄，核固缩?深染及碎裂，伴有数量不等的各种炎症细胞?
4.1.3滴虫性阴道炎 由滴虫感染所致?涂片中可见鳞状上皮各层细胞?青年女性常伴有溃疡，见较多的底层细胞；老年妇女可见较多的表层细胞，因为阴道滴虫常促进鳞状上皮分化成熟?但并不表示雌激素水平的低落和增高?根据感染程度，可见数量多少不等的各种炎症细胞及滴虫[3]?
4.2宫颈癌细胞形态 在女性生殖器官的恶性肿瘤中，以宫颈癌最为多见?宫颈癌中又以鳞癌多见，占宫颈癌的95%，其次为腺癌，未分化癌极少见?
4.2.1鳞癌 根据肿瘤细胞分化程度又分高分化鳞癌和低分化鳞癌，以低分化鳞癌最为多见?高分化鳞癌：①癌细胞多散在分布?②癌细胞体积较大，胞质丰富，多数有角化而红染?③胞核显著增大，畸形?深染明显?④癌细胞形态多异，可出现纤维形?蝌蚪形?蜘蛛形，有时可见癌珠?低分化鳞癌：①癌细胞多成群出现?②癌细胞圆形或卵圆形，相当于外底层或中层细胞，分化越差，细胞越小，胞质较少，角化不明显?③胞核呈不规则圆形或卵圆形，核胞质比明显增大?
4.2.2腺癌 较少见，约占5%，以高分化腺癌多见?胞体中等大小，大小不一，呈圆形?卵圆形或不规则形?胞质丰富，胞质内含有粘液空泡，可见印戒样癌细胞?胞核呈圆形?卵圆形或不规则圆形，有轻度至中度畸形，常见巨大核仁?癌细胞分散也可成团脱落，成团的癌细胞极性紊乱，在细胞团周边部的癌细胞呈栅栏状排列?
参考文献
[1] 吕卫国；谢幸.宫颈癌的筛查[J].中国实用妇科与产科杂志.2006.（1）：8-9
[2] 罗晓云，严子禾，丁月华；阴道分泌物常规检查方法的改进[J]；华北煤炭医学院学报；2002.（05）：580.
[3] 李崇剑；许凯声.6803例阴道分泌物常规检查结果分析.上海医学检验杂志.2000.（1）：56-56
关键词：阴道脱落细胞检查；标本采集；染色；细胞形态
【中图分类号】R711.73 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602（2015）05-0172-02
女性生殖道各器官所覆盖的上皮主要有两种?一是鳞状上皮，主要见于阴道?子宫颈外口等部位；二是柱状上皮，主要见于输卵管?子宫内腔?子宫颈管等部位?子宫颈外口鳞状上皮和柱状上皮交接处是子宫颈癌的好发部位?通过阴道分泌物细胞学检查，对于生殖道肿瘤的早期防治有着重要的意义?
1 一般资料
对2014年1月～12月收治的妇产科患者60例，年龄 22～43岁，平均29岁?均为已婚妇女做宫颈刮片进行阴道脱落细胞检查?
2 标本采集
2.1采集前准备工作 在清洁玻璃片上方刻好号码，在送检申请单上亦写好同一号码?准备好清洁刮板?刮板可取木制或竹制压舌板的一半，一端做成半月形?准备好玻璃吸管以采集后穹隆标本?准备固定液：常用固定液有以下三种：①固定液最好用等分量之95%乙醇与乙醚?乙醚容易挥发，瓶口必须塞紧?此固定液细胞染色最为清楚?②95%乙醇固定液，一般用于普查工作?固定时间不要超过30分钟，固定时间长可影响核的着色?③甲醇固定液?固定液每次用过，必须过滤后再用，以防止玻璃片上冲洗下来的细胞污染，一般固定10分钟以上即可染色?
2.2采取方法：不同的检查目的，可选择不同部位取材?一般采用生理盐水浸湿的棉拭子于阴道深部或宫颈管口?阴道穹隆后部等处取材?必须在标本干燥前尽快投入固定液内，以防细胞破坏，固定时间不得短于15分钟?最理想的制片方法是一个患者的涂片单独固定，以防止细胞标本相互污染[1]?经过巴氏染色?姬姆萨染色或革兰染色，进行肿瘤细胞筛选或病原微生物检查?
2.3临床经验
2.3.1采取标本前24小时内患者应无性交?盆浴或阴道冲洗?所用器械必须清洁?干燥，不黏附任何化学药品，如酒精?肥皂水等，亦不可使用任何润滑剂?
2.3.2取得的标本刮在玻片上时，应向一个方向涂抹，切忌往返，以免损坏细胞；涂片厚薄宜适中，过厚染色不良，并易脱落，过薄细胞稀少，影响诊断?
2.3.3如果盛固定液之器皿中没有分格或无固定架时，则需在每张玻片上卡一曲别针，以防两片相粘，损坏标本?
3 常用染色法
3.1简易快速癌细胞染色法 此法为上海市纺织工业局第二医院于1958年用于癌細胞检查，经改进更宜于配制和应用?
3.1.1染液配制 第一液：1液：盐基湖蓝1 g，溶于100 ml水内；2液：高锰酸钾（AR试剂二级）1 g，溶于100 ml水内?将1?2液分别装于三角烧瓶中煮沸，溶解后将2液倾入1液混合后再煮沸25分钟，趋热过滤即可?第二液：1%伊红乙醇（85%）溶液?
3.1.2染色步骤 涂片标本经干燥后用甲醇固定10分钟?标本于第一液内染3～4秒，水洗?放入第二液内3～4秒，水洗后，玻片反面揩干即可镜检?
3.2瑞氏-姬姆萨复合染色 瑞氏和姬姆萨两种染色原理基本相同，而染色又各有优缺点，因此在细胞学检查中常用两者复合染色，以取长补短，互相补充?染色结果，胞浆结果，胞浆及其中颗粒与核染色质均匀较满意?
3.2.1试剂 瑞氏-姬姆萨染液配制法：瑞氏粉 0.38 g，姬姆萨粉0.03 g；甲醇 100 ml?先将瑞氏粉与姬姆萨粉放在清洁?干燥的乳钵里，加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将已溶解的染料倒入棕色瓶中，未溶解的再加少量甲醇溶解，甲醇全部用完为止?配好的染色液48小时后可以使用，放置越久越好用[2]?pH 6.4～6.8磷酸盐缓冲液：磷酸二氢钾（KH2PO4） 0.3 g，磷酸氢二钠（Na2HPO4） 0.2 g，蒸馏水 加至1 000 ml，配好后用磷酸溶液校正pH，如无缓冲液也可用新鲜蒸馏水代替?
3.2.2染色步骤 涂片上滴加瑞氏-姬姆萨染色液适量?1分钟后加缓冲液适量?
4阴道脱落细胞检查细胞形态
4.1女性生殖道炎症的细胞形态 女性生殖道炎症是妇女的常见病?长期?慢性炎症刺激，又可诱发核异质甚至恶性肿瘤?识别炎症病变的细胞形态变化，对于诊断与癌症鉴别都有重要意义?
4.1.1慢性子宫颈炎 为妇女最为常见的疾病?临床表现为白带增多，宫颈糜烂或肥大或出现息肉?涂片背景“污浊”，粘液?白细胞?吞噬细胞及细胞碎片较多，上皮细胞可出现各种炎症变化，如核轻度增大?深染?胞质出现空泡?底层细胞增多，重度也可出现核异质?
4.1.2老年性阴道炎 见于绝经后的老年妇女?涂片中以萎缩型基底层细胞为主，细胞较小?大小不一，胞质变薄，核固缩?深染及碎裂，伴有数量不等的各种炎症细胞?
4.1.3滴虫性阴道炎 由滴虫感染所致?涂片中可见鳞状上皮各层细胞?青年女性常伴有溃疡，见较多的底层细胞；老年妇女可见较多的表层细胞，因为阴道滴虫常促进鳞状上皮分化成熟?但并不表示雌激素水平的低落和增高?根据感染程度，可见数量多少不等的各种炎症细胞及滴虫[3]?
4.2宫颈癌细胞形态 在女性生殖器官的恶性肿瘤中，以宫颈癌最为多见?宫颈癌中又以鳞癌多见，占宫颈癌的95%，其次为腺癌，未分化癌极少见?
4.2.1鳞癌 根据肿瘤细胞分化程度又分高分化鳞癌和低分化鳞癌，以低分化鳞癌最为多见?高分化鳞癌：①癌细胞多散在分布?②癌细胞体积较大，胞质丰富，多数有角化而红染?③胞核显著增大，畸形?深染明显?④癌细胞形态多异，可出现纤维形?蝌蚪形?蜘蛛形，有时可见癌珠?低分化鳞癌：①癌细胞多成群出现?②癌细胞圆形或卵圆形，相当于外底层或中层细胞，分化越差，细胞越小，胞质较少，角化不明显?③胞核呈不规则圆形或卵圆形，核胞质比明显增大?
4.2.2腺癌 较少见，约占5%，以高分化腺癌多见?胞体中等大小，大小不一，呈圆形?卵圆形或不规则形?胞质丰富，胞质内含有粘液空泡，可见印戒样癌细胞?胞核呈圆形?卵圆形或不规则圆形，有轻度至中度畸形，常见巨大核仁?癌细胞分散也可成团脱落，成团的癌细胞极性紊乱，在细胞团周边部的癌细胞呈栅栏状排列?
参考文献
[1] 吕卫国；谢幸.宫颈癌的筛查[J].中国实用妇科与产科杂志.2006.（1）：8-9
[2] 罗晓云，严子禾，丁月华；阴道分泌物常规检查方法的改进[J]；华北煤炭医学院学报；2002.（05）：580.
[3] 李崇剑；许凯声.6803例阴道分泌物常规检查结果分析.上海医学检验杂志.2000.（1）：56-56