探讨Cdc42－shRNA重组质粒对肝癌细胞SMMC－7721增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为的影响。
方法Cdc42－shRNA重组质粒及空载体转染人肝癌细胞株SMMC－7721，建立Cdc42－shRNA组和对照组U6－control。采用MTT法检测细胞增殖情况，划痕愈合实验测定细胞迁移能力，Transwell法观察细胞的侵袭能力，免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和甲胎蛋白(AFP)表达水平。建立裸鼠皮下人肝癌移植瘤模型，观察裸鼠成瘤情况，免疫组化法检测裸鼠瘤块中Cdc42的表达情况。组间数据两两比较采用t检验。
结果MTT实验结果显示，Cdc42－shRNA2组、U6－control组和SMMC7721组细胞倍增时间分别为42.7、34.9、35.1 h；划痕实验结果显示，转染Cdc42－shRNA2组和U6－control组细胞36 h相对迁移距离分别为(47.1±4.1)%和(86.6±5.3)%，差异有统计学意义(t＝－10.21，P<0.05)；Transwell法检测结果显示，Cdc42－shRNA2组24 h穿膜细胞数为(18.2±2.1)个，低于U6－control组的(41.0±3.5)个(t＝－9.67，P<0.05)；与对照组相比，Cdc42－shRNA组细胞的AFP和PCNA的蛋白表达水平降低；裸鼠成瘤实验结果显示，接种28 d后Cdc42－shRNA2组平均肿瘤重量分别为(335.1±178.2)mg，低于SMMC－7721组的(925.3±241.4)mg和U6－control组的(910.5±225.6)mg(t＝－4.47、－4.39，P<0.05)。免疫组化结果显示Cdc42蛋白在肝癌细胞质内广泛表达。其中SMMC7721组及U6－control组呈强阳性表达；SMMC7721/Cdc42－shRNA2组呈弱阳性表达。
结论沉默Cdc42表达，可以降低人肝癌细胞种植瘤的增殖、迁移及侵袭能力，抑制肿瘤细胞生长。