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【摘要】目的：对白血病/淋巴瘤免疫分型检验技术进行研究。方法：选择2015年1月至2015年11月间收治的白血病/淋巴瘤患者20例，采用流式细胞术对患者的免疫分型进行检验，讨论流式细胞术在白血病/淋巴瘤免疫分型检验中的应用价值。结果：入选的20例患者中ALL11例，其中B-ALL6例、T-ALL5例，AML9例；B-ALL患者HLA-DR阳性表达率最高，为100%，CD21、CD38、CD22依次为94.2%、91.3%、59.8%；T-ALL患者CD25阳性表达率最高，为100.0%，CD1、CD71、CD38依次为76.2%、65.3%、52.9%；AML患者MPO阳性表达率最高，为91.2%，CD15、CD68、HLA-DR、CD64依次为86.6%、81.2%、83.2%、65.7%；AML合并淋系抗原2例，CD25、CD24阳性率为7.6%、1.6%。结论：白血病/淋巴瘤患者应用流式细胞术进行免疫分析，对疾病的诊断及治疗具有重要意义。
【关键词】白血病；淋巴瘤；免疫分型；流式细胞术
【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2016）02-0205-01
白血病/淋巴瘤现已成为临床治疗中的多发疾病，随着生活环境的污染、饮食结构及生活习惯的改变，白血病/淋巴瘤的发生不但在逐年升高，且发病人群也逐渐趋于年轻化。白血病/淋巴瘤的免疫分型检验可为疾病的诊断及治疗提供更加完善的临床依据，并对治疗效果进行有效评价，流式细胞术在白血病/淋巴瘤免疫分型检验中具有较高的利用率。现以40例白血病/淋巴瘤患者为对象，对流式细胞术的应用价值进行研究。
1 资料与方法
1.1一般资料
选择2015年1月至2015年11月间收治的白血病/淋巴瘤患者20例。患者年龄在16-74岁之间，平均年龄为（42.7±24.6）岁；其中男性患者12例，女性患者8例。
1.2检验方法
1.2.1样本采集
抽取患者静脉血5ml，真空肝素抗凝采血管盛装；淋巴瘤患者可做穿刺活检，应用EDTA三或二钾进行抗凝处理；样本对号标记、合理储存；检验时如血液标本出现溶血、凝固现象则弃用，重新进行样本采集，样本采集完成至检验不可超过1d。
1.2.2免疫分型
采用四色免疫分型法进行检测：100ul样本内混入20ul常用免疫分型单克隆抗体，在20摄氏度的环境下避光孵育15分钟；续加溶血剂，完全融合后继续避光孵育10分钟；以浓度为10mmol/L的弱碱性磷酸盐溶液为缓冲液，样本2000r/min条件下离心5min，去除上层血清，分离单核细胞；将分离后的单核细胞制成浓度为107/L的细胞悬浊液，完成检验样本配置，放置流式细胞仪中等待检测；NK淋系白血病单抗为CD16、CD57，B淋系白血病单抗为CD21、CD22、CD24，T淋系白血病单抗为CD71、CD1、CD25，髓系白血病单抗为CD15、CD64、CD68、MPO（髓过氧化物酶），非系列特异性白血病单抗为CD9、CD38、CD45、HLA-DR；仪器检验前调试，使变异系数小于2%，以CD45/SSC为设门，淋巴、髓系抗原超过20%、高度特异性抗原超过10%作为判断标准。
1.3数据处理
文中数据采用spss17.0软件进行处理，计数资料采用%表示，资料采用卡方检验，计量资料采用 ±S表示，资料采用t值检验，P<0.05，数据差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 入选的20例患者流式细胞术免疫分型结果为ALL11例，所占比例为60.0%，AML9例，所占比例为40.0%。
2.2 11例ALL患者中，6例B-ALL，所占比例为54.55%；5例T-ALL，所占比例为45.45%；B-ALL患者的HLA-DR的阳性表达率为100.0%，CD21的阳性表达率为94.2%，CD38的阳性表达率为91.3%，CD22的阳性表达率为59.8%；T-ALL患者CD25的阳性表达率为100.0%，CD1、CD71的阳性表达率分别为76.2%、65.3%，CD38的阳性表达率为52.9%。
2.3 9例AML患者中，髓系白血病特异性抗原MPO的阳性表达率最高，为91.2%，其次为CD15，其阳性表达率为86.6%，CD68的阳性表达率为81.2%，HLA-DR的阳性表达率为83.2%，CD64的阳性表達率最低，为65.7%；AML患者中有2例患者伴随T淋系及B淋系抗原表达，CD25的阳性表达率为7.6%，CD24的阳性表达率为1.6%。
3 讨论
白血病/淋巴瘤是一种致死率极高的全身性癌症，疾病的早期诊断及有效治疗方案的实施，对维持患者机体功能，延长患者生存时间具有重要意义[1]。现今临床上所采用的诊断方法多缺乏特异性，无法为临床诊断、治疗提供更多的临床依据。
免疫分型在白血病/淋巴瘤中具有较高的临床应用价值，可利用单抗对白细胞细胞浆中或表面的抗原进行分析[2]，寻找细胞来源，明确细胞分化阶段，进而为临床治疗、诊断提供确切的依据，甚至可对治疗后的临床效果进行有效评估[3]。流式细胞术是一种快捷、精确、准确性高的免疫分型方式。流式细胞术是以标记后的单抗作为分子探针，根据细胞克隆过程中抗原的表达方式，对细胞克隆的特点及所处阶段进行分析，进而对白细胞的分化程度、所属类别进行划分[4]。
采用流式细胞术对白血病/淋巴瘤患者进行免疫分析，可为患者制定具有针对性的治疗方案，对提高患者生存率、延长患者生存时间具有重要意义[5]。
参考文献：
[1]李娜.淋巴系统白血病细胞免疫分型的临床研究[D].吉林大学，2012.
[2]周丽兰.流式细胞术免疫分型在非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的研究[D].昆明医学院，2011.
[3]朱明清.白血病和淋巴瘤免疫分型的标准化方案[A].中华医学会、中华医学会检验分会.中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C].中华医学会、中华医学会检验分会：，2012：2.
[4]孙晓非，何丽容，冯海林，严苏丽，夏忠军，陈晓勤.多参数流式细胞术在淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯诊断的应用[J].癌症，2003，11：1232-1236.
[5]刘鑫，庞铁光.流式细胞术在白血病和淋巴瘤诊断中的应用[J].内蒙古民族大学学报（自然科学版），2010，03：347-350.
【关键词】白血病；淋巴瘤；免疫分型；流式细胞术
【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2016）02-0205-01
白血病/淋巴瘤现已成为临床治疗中的多发疾病，随着生活环境的污染、饮食结构及生活习惯的改变，白血病/淋巴瘤的发生不但在逐年升高，且发病人群也逐渐趋于年轻化。白血病/淋巴瘤的免疫分型检验可为疾病的诊断及治疗提供更加完善的临床依据，并对治疗效果进行有效评价，流式细胞术在白血病/淋巴瘤免疫分型检验中具有较高的利用率。现以40例白血病/淋巴瘤患者为对象，对流式细胞术的应用价值进行研究。
1 资料与方法
1.1一般资料
选择2015年1月至2015年11月间收治的白血病/淋巴瘤患者20例。患者年龄在16-74岁之间，平均年龄为（42.7±24.6）岁；其中男性患者12例，女性患者8例。
1.2检验方法
1.2.1样本采集
抽取患者静脉血5ml，真空肝素抗凝采血管盛装；淋巴瘤患者可做穿刺活检，应用EDTA三或二钾进行抗凝处理；样本对号标记、合理储存；检验时如血液标本出现溶血、凝固现象则弃用，重新进行样本采集，样本采集完成至检验不可超过1d。
1.2.2免疫分型
采用四色免疫分型法进行检测：100ul样本内混入20ul常用免疫分型单克隆抗体，在20摄氏度的环境下避光孵育15分钟；续加溶血剂，完全融合后继续避光孵育10分钟；以浓度为10mmol/L的弱碱性磷酸盐溶液为缓冲液，样本2000r/min条件下离心5min，去除上层血清，分离单核细胞；将分离后的单核细胞制成浓度为107/L的细胞悬浊液，完成检验样本配置，放置流式细胞仪中等待检测；NK淋系白血病单抗为CD16、CD57，B淋系白血病单抗为CD21、CD22、CD24，T淋系白血病单抗为CD71、CD1、CD25，髓系白血病单抗为CD15、CD64、CD68、MPO（髓过氧化物酶），非系列特异性白血病单抗为CD9、CD38、CD45、HLA-DR；仪器检验前调试，使变异系数小于2%，以CD45/SSC为设门，淋巴、髓系抗原超过20%、高度特异性抗原超过10%作为判断标准。
1.3数据处理
文中数据采用spss17.0软件进行处理，计数资料采用%表示，资料采用卡方检验，计量资料采用 ±S表示，资料采用t值检验，P<0.05，数据差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 入选的20例患者流式细胞术免疫分型结果为ALL11例，所占比例为60.0%，AML9例，所占比例为40.0%。
2.2 11例ALL患者中，6例B-ALL，所占比例为54.55%；5例T-ALL，所占比例为45.45%；B-ALL患者的HLA-DR的阳性表达率为100.0%，CD21的阳性表达率为94.2%，CD38的阳性表达率为91.3%，CD22的阳性表达率为59.8%；T-ALL患者CD25的阳性表达率为100.0%，CD1、CD71的阳性表达率分别为76.2%、65.3%，CD38的阳性表达率为52.9%。
2.3 9例AML患者中，髓系白血病特异性抗原MPO的阳性表达率最高，为91.2%，其次为CD15，其阳性表达率为86.6%，CD68的阳性表达率为81.2%，HLA-DR的阳性表达率为83.2%，CD64的阳性表達率最低，为65.7%；AML患者中有2例患者伴随T淋系及B淋系抗原表达，CD25的阳性表达率为7.6%，CD24的阳性表达率为1.6%。
3 讨论
白血病/淋巴瘤是一种致死率极高的全身性癌症，疾病的早期诊断及有效治疗方案的实施，对维持患者机体功能，延长患者生存时间具有重要意义[1]。现今临床上所采用的诊断方法多缺乏特异性，无法为临床诊断、治疗提供更多的临床依据。
免疫分型在白血病/淋巴瘤中具有较高的临床应用价值，可利用单抗对白细胞细胞浆中或表面的抗原进行分析[2]，寻找细胞来源，明确细胞分化阶段，进而为临床治疗、诊断提供确切的依据，甚至可对治疗后的临床效果进行有效评估[3]。流式细胞术是一种快捷、精确、准确性高的免疫分型方式。流式细胞术是以标记后的单抗作为分子探针，根据细胞克隆过程中抗原的表达方式，对细胞克隆的特点及所处阶段进行分析，进而对白细胞的分化程度、所属类别进行划分[4]。
采用流式细胞术对白血病/淋巴瘤患者进行免疫分析，可为患者制定具有针对性的治疗方案，对提高患者生存率、延长患者生存时间具有重要意义[5]。
参考文献：
[1]李娜.淋巴系统白血病细胞免疫分型的临床研究[D].吉林大学，2012.
[2]周丽兰.流式细胞术免疫分型在非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的研究[D].昆明医学院，2011.
[3]朱明清.白血病和淋巴瘤免疫分型的标准化方案[A].中华医学会、中华医学会检验分会.中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C].中华医学会、中华医学会检验分会：，2012：2.
[4]孙晓非，何丽容，冯海林，严苏丽，夏忠军，陈晓勤.多参数流式细胞术在淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯诊断的应用[J].癌症，2003，11：1232-1236.
[5]刘鑫，庞铁光.流式细胞术在白血病和淋巴瘤诊断中的应用[J].内蒙古民族大学学报（自然科学版），2010，03：347-350.