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对反相高效液相色谱法测定烟草中烟碱的方法进行了研究，并对样品中烟碱的含量进行了测定。色谱柱为Kromasil C18流动相为甲醇（A）-三乙胺磷酸缓冲液（B），柱温35℃，流速1．0mL·min^-1,检测波长259nm，进样量10μL。该方法具有精密度高、稳定性好、重现性好、灵敏度高等特点。测定结果的标准偏差为0．014，变异系数为1．2％，线性相关系数为1．0，回收率为98．8％。