【摘 要】
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目的 构建一种对子宫颈癌HeLa细胞有特异性杀伤作用的志贺毒素 2A 促黄体生成素释放激素 (Stx2A LHRH)重组毒素 ,以探索其成为新型靶向药物的可能性。方法 用聚合酶链反应(
【机 构】
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吉林大学第一医院妇产科,吉林大学第一医院妇产科,解放军军需大学军事兽医研究所,解放军军需大学军事兽医研究所,解放军军需大学军事兽医研究所,吉林大学第二医院妇产科,吉林大学第一医院妇产科 130021长
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目的 构建一种对子宫颈癌HeLa细胞有特异性杀伤作用的志贺毒素 2A 促黄体生成素释放激素 (Stx2A LHRH)重组毒素 ,以探索其成为新型靶向药物的可能性。方法 用聚合酶链反应(PCR)技术扩增Stx2A LHRHDNA片段 ,克隆至pET 2 0b(+)质粒中 ,酶切鉴定及测序证明成功地构建了重组毒素表达质粒pET Stx2A LHRH ,将其转染大肠杆菌BL2 1(DE3 )菌株后 ,以异丙基 β D 硫代半乳糖苷诱导 ,十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳及凝胶薄层扫描分析Stx2A LHRH重组毒素的表达情况。倒置显微镜下观察Stx2A LHRH对HeLa细胞的作用。结果 SDS PAGE电泳分析显示 ,在实验上清液中 ,诱导出相对分子质量为 3 80 0 0的融合蛋白 ,说明该载体表达了Stx2A LHRH重组毒素 ,且其表达量占上清液中总蛋白的 10 3 2 %。加入Stx2A LHRH重组毒素后 ,宫颈癌HeLa细胞几乎全部死亡。结论 成功构建了Stx2A LHRH重组毒素 ,为研制治疗子宫颈癌的新型药物提供了理论依据
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