【摘 要】
：
采用原核表达系统表达了PCV2b/2d-Cap的重组纳米抗体，并对其与PCV2b和PCV2d亚型Cap蛋白的结合能力进行了初步探索。以羊驼筛选到的纳米抗体基因为模板，通过PCR将纳米抗体基因片段进行扩增。经双酶切及连接反应后，将纳米抗体基因片段（VHH）插入到经改造的pET28a-SUMO载体中，构建了pET28a-SUMO-VHH重组质粒。将构建好的质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞
【基金项目】
：
国家自然科学基金面上基金资助项目（32071476）；
论文部分内容阅读
采用原核表达系统表达了PCV2b/2d-Cap的重组纳米抗体，并对其与PCV2b和PCV2d亚型Cap蛋白的结合能力进行了初步探索。以羊驼筛选到的纳米抗体基因为模板，通过PCR将纳米抗体基因片段进行扩增。经双酶切及连接反应后，将纳米抗体基因片段（VHH）插入到经改造的pET28a-SUMO载体中，构建了pET28a-SUMO-VHH重组质粒。将构建好的质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中诱导表达。表达产物通过亲和层析、除去SUMO标签以及分子筛凝胶过滤层析进行纯化。并通过Bio-dot Western Blot和间接ELISA方法检测了该纳米抗体与PCV2b/2d-Cap蛋白的结合能力。结果表明，构建的重组质粒测序正确；经纯化得到的纳米抗体蛋白大小约为14 kDa；间接ELISA实验证实该纳米抗体对PCV2b/2d-Cap蛋白检测下限均为0.68 ng/μL。该纳米抗体是一株与PCV2b和PCV2d亚型Cap蛋白均具有交叉反应的纳米抗体，为PCV2b/2d亚型的临床检测建立新型诊断方法奠定基础。
其他文献
＜正＞合理饮食是儿童肾病管理的一项重要内容，目的是促进患儿正常发育，矫正机体内的某些分解代谢异常，保护残留的肾脏功能，减少代谢废物在体内潴留和水电解质平衡失调，提高患儿的生活质量，延缓肾病发展。照顾者需要根据肾脏疾病类型、肾功能状况和蛋白尿的程度，同时密切关注患儿的血压、水肿及病情变化，制定合理的饮食，鼓励积极配合，保证所需营养成分的均衡摄入，以促进肾病儿童的康复。以下列举几个有代表性的疾病供读者
＜正＞连政办发〔2023〕34号各县、区人民政府,市各委办局,市各直属单位:《连云港市新污染物治理工作方案》已经市十五届政府第30次常务会议审议通过,现印发给你们,请认真贯彻执行。2023年7月27日连云港市新污染物治理工作方案为贯彻落实《国务院办公厅关于印发新污染物治理行动方案的通知》（国办发〔2022〕15号）和《省政府办公厅关于印发江苏省新污染物治理工作方案的通知》（苏政办发〔2022〕81
《客家珍稀文书丛刊》所录清代梅州地区的契约文书中有不少音借字，为梅州客家方言的研究提供了重要的语音信息。对其中20多条音借字进行考辨，进而讨论了这些音借字反映出的梅州客家方音现象：精知庄章组合流；次浊声母疑、日、云、以母相混；开口三等和合口三等相混；遇摄、止摄、蟹摄相混；梗摄、曾摄、臻摄相混等。这些为客家方音研究提供了重要参考价值。
[目的/意义]为提高知识协同质量，针对开放式平台的知识协同过程，分析“回音室效应”的成因及其影响因素，以帮助企业更有效地利用协同数据。[方法/过程]从观点动力学的视角出发，首先考虑知识水平、消极情绪等因素，建立个体决策模型；然后基于马尔可夫链建立群体观点演化模型，用以分析任意网络结构和规模的群体观点演化过程；最后利用群体观点异质性指标，检验是否存在“回音室效应”，并探究各因素与异质性的关系。[结果
目的:本研究旨在基于网络药理学筛选柚皮苷防治牙周炎的靶点和通路,再通过实验性大鼠牙周炎和成骨前体细胞分别在体内和体外探讨柚皮苷促进牙槽骨成骨的疗效及机制,为进一步开发含柚皮苷的牙周防治药物提供理论和实验依据,还为牙周炎的防治提供新思路和方法。方法:1.SWISSADME、ADMETLAB 2.0和PROTOX Ⅱ数据库预测柚皮苷的吸收、分布、代谢、排泄和毒性的参数;TCMSP和Pub Chem获取
近年来，欧美监管机构对担保品管理的重视程度不断提升，国际上出现了以优质债券作为合格担保品的热潮。在我国金融市场，第三方担保品管理工具的推出使得优质债券作为合格担保品可以得到更广泛的应用。本文归纳了商业银行在跨境业务、外币市场、授信管理和绿色债券市场四大领域应用第三方担保品管理工具的场景，并从建立以优质债券为基石的金融信用体系等方面对我国债券担保品管理的发展提出建议。
目的:调查湖北省口腔医疗机构橡皮障隔离术的应用现状。方法:采用方便抽样的方法，利用自行设计的问卷调查表对湖北省13个行政区域的1171名口腔从业人员进行橡皮障隔离术的应用现状调查，数据通过SPSS 20.0软件进行统计学分析。结果:回收有效问卷1167份，橡皮障隔离术知识知晓率、信念持有率和行为形成率3个维度的总得分率分别为76.4%、51.3%和34.9%。应用橡皮障隔离术占比最高的治疗项目为根
加强新污染物治理是持续改善生态环境质量、切实保障生态环境安全和人民群众身体健康的重要抓手. 自《新污染物治理行动方案》发布以来，各地方省级行政区相继发布《新污染物治理工作方案》（简称“《工作方案》”），推进新污染物治理工作. 该文从时间历程、重点行业、重点新污染物种类和责任主体等方面出发，分析了各省级行政区新污染物治理工作的特点，总结了各省级行政区在标准建立、调查监测、源头减量化和协同治理等方面的
＜正＞《3～6岁儿童学习与发展指南》（下文简称《指南》）是儿童发展的基本蓝图与儿童研究的科学导引。我园积极贯彻落实《指南》精神,立足"关心教育"园本实际情况,通过观察梳理、分析研判、链接跟进,帮助幼儿实现经验的层层递进、深化和拓展,从而推动幼儿园课程质量的不断提升。一、观察梳理——课程资源建设专业内容的再认识要让课程真正有效地促进幼儿发展,就必须要让"物质"形态的课程最终转化为"精神"形态的儿童经