【摘 要】
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目的探讨在体内缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)条件下,脑衰蛋白调节蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP-2)与轴突及树突损伤的关系。方法以10日龄新生SD大鼠
【机 构】
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四川大学华西第二医院儿科妇儿疾病与出生缺陷教育部重点实验室,
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目的探讨在体内缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)条件下,脑衰蛋白调节蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP-2)与轴突及树突损伤的关系。方法以10日龄新生SD大鼠为研究对象,行右侧颈总动脉结扎手术,8%氧氮混合气缺氧2.5h制作HI模型。Western blot法检测HI后大鼠皮层及海马脑组织CRMP-2总蛋白和磷酸化蛋白、淀粉样前蛋白(amyloid precursor protein,APP)表达变化;使用蛋白激酶B(Akt)抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)和LY294002后,Western blot和免疫组化染色法检测CRMP-2总蛋白和磷酸化蛋白在HI后4h、24h改变;HI后72h,Western blot和免疫组化检测渥曼青霉素对APP表达的影响,电镜检测轴突及树突损伤。结果 HI后CRMP-2总蛋白表达无明显变化;磷酸化CRMP-2(p-CRMP-2)蛋白表达在0.5h短暂上升,此后一直处于低水平;HI后APP蛋白表达在2h开始上升,此后2~24h一直处于稳定增高水平,48~72h表达量再次增高。HI后4h和24h,渥曼青霉素或LY294002干预未改变CRMP-2总蛋白表达量,但p-CRMP-2的表达量增加。HI后72h,渥曼青霉素预处理增加APP的表达量,加重轴突及树突损伤。结论 CRMP-2作为Akt信号通路下游蛋白,参与调控新生大鼠HI后神经元轴突和树突损伤。
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