【摘 要】
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目的 制备乙型脑炎病毒(JEV)单克隆抗体,应用于猪源性生物制品中JEV的检测.方法 提纯病毒抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA方法筛选和有限稀
【机 构】
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中国药品生物制品检定所,国家实验动物微生物、遗传检测中心,北京,100050
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目的 制备乙型脑炎病毒(JEV)单克隆抗体,应用于猪源性生物制品中JEV的检测.方法 提纯病毒抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA方法筛选和有限稀释法三次克隆获得4株杂交瘤细胞,并应用琼脂扩散、酶联免疫吸附试验和免疫荧光方法进行抗体鉴定和样品检测.结果 获得4株稳定分泌JEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株G10、F4、C10、A5,免疫荧光抗体实验证实是特异的抗JEV抗体,其免疫球蛋白亚类G10和F4为IgG1,A5为IgM,C10未鉴定出其亚类.G10和F4腹水效价为105以上,C10和A5腹水效价为102以上.结论 成功制备了抗JEV单克隆抗体,建立了以单抗介导的间接ELISA和间接IFA检测方法,并应用于猪源性生物制品中JEV的检测.
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