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目的
观察脑糖原磷酸化酶(PYGB)对人骨肉瘤细胞株MG63的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期分布的影响。
方法通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测35例骨肉瘤和15例骨囊肿标本的PYGB表达水平。采用Western blot法挑选PYGB高表达的骨肉瘤细胞株。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)方法测定细胞增殖，使用流式细胞仪检测MG63细胞凋亡和细胞周期，Western blot法分别检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的表达。
结果骨肉瘤组的PYGB表达(0.105±0.945)水平明显较骨囊肿组(0.062±0.038)高(P＝0.006)。小干扰RNA沉默PYGB后的骨肉瘤细胞的增殖明显降低，PYGB干扰组的G1期细胞比例从(49.74±1.54)%增加至(69.41±2.35)%(P＝0.004)，而S期细胞比例从(21.04±2.59)%下降至(14.15±0.98)%(P＝0.028)。G2期百分比从(25.62±0.64)%减少至(8.19±0.11)%(P＝0.002)，表明细胞周期受阻断在G1期。PYGB干扰组的bax的表达水平显著增加，而bcl-2的表达水平显著降低。
结论PYGB的小干扰RNA通过靶向抑制半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)/bcl和细胞周期蛋白依赖激酶1(CDK1)信号通路而抑制人骨肉瘤细胞MG63细胞的增殖。